6628926097

WYKONANIE ĆWICZENIA Zadanie 1. Otrzymanie preparatu lecytyny.

Sprzęt:

♦    wytrząsarka

♦    kolbki stożkowe z korkami

♦    lejki

♦    kolbki ssawkowe

♦    sączki

♦    wyparka próżniowa

Materiał i odczynniki:

♦    jaja kurze -4 sztuki

♦    aceton

♦    metanol

♦    chloroform

♦    eter dietylowy

Wykonanie ćwiczenia:

Żółtka z 4 jaj przenieść do dwóch kolbek stożkowych na 250 ml (po dwa żółtka do kolbki), dodać po 50 ml acetonu ochłodzonego do -15°C i mieszać na mieszadle magnetycznym przez minutę. Mieszaninę z każdej kolbki odsączyć na osobnym lejku Buchnera, a osady przenieść do kolbek i ponownie zadać po 50 ml zimnego acetonu. Mieszać minutę i odsączyć. Operację powtórzyć w sumie pięć razy. W rezultacie otrzymuje się sumarycznie około 40 g białego osadu.

Osad przenieść w równych porcjach do 8 kolbek stożkowych i do każdej dodać 30 ml mieszaniny złożonej z 250 ml metanolu i 50 ml chloroformu. Kolbki zatkać korkami, uszczelnić parafilmem, umieścić w wytrząsarce i wytrząsać przez lh. Po tym czasie podzielić kolbki pomiędzy cztery sekcje (po dwie kolbki dla każdej sekcji), odsączyć osady z kolbek, a przesącze połączyć, przenieść odpowiednio do czterech zważonych kolbek okrągłodennych i oddestylować do sucha na wyparce próżniowej w temperaturze nie wyższej niż 40°C. Każdą z otrzymanych pozostałości rozpuścić w 5 ml bezwodnego zimnego eteru, oziębić do -5°C, a następnie dodać 45 ml zimnego acetonu. Całość wstawić na lh do zamrażarki, a następnie szybko odsączyć. Osady (sumarycznie około 3g) to surowy preparat lecytyny.

5