Pracownia z BIOCHEMII dla studentów III roku Wydziału Chemii UA

ZAKRES MATERIAA
U
ĆWICZENIE 1  Aminokwasy, białka i sacharydy (cukry)
1. Wzory występujących w ćwiczeniu 1 aminokwasów i sacharydów (wzory łańcuchowe i
Hawortha); konfiguracja (S/R; L/D) naturalnych aminokwasów i cukrów.
2. Reakcje charakterystyczne aminokwasów, białek, sacharydów (równania reakcji,
obserwacje); bilans jonowo-elektronowy reakcji redoks.
3. Pojęcia: punkt izoelektryczny, koagulacja białek, wysalanie białek, denaturacja białek,
sacharyd redukujący, sacharyd nieredukujący.
4. Czynniki powodujące koagulację i denaturację białek.
5. Struktura I-, II-, III-rzędowa białek.
6. Metody oznaczania C-końcowego aminokwasu w wyniku hydrazynolizy oraz
N-końcowego aminokwasu metodami: Edmana, dinitrofenylowania i dansylowania
(równania reakcji).
7. Ilościowe oznaczanie zawartości aminokwasów (i składu aminokwasowego białek)
metodą ninhydrynową i białek metodą biuretową; wykorzystanie metod HPLC.
ĆWICZENIE 2  Izolowanie i identyfikacja wybranych barwników roślinnych
1. Podział lipidów i ich budowa.
2. Budowa chloroplastów i ich rola w procesie fotosyntezy.
3. Pojęcia związane z chromatografią: chromatografia adsorpcyjna, kolumnowa, TLC,
eluent, typy faz stacjonarnych, szereg eluotropowy, kolejność wymywania związków w
chromatografii na silica żelu, R (i jego związek z polarnością związków).
f
4. Związek między strukturą a barwą związków organicznych (i długością absorbowanej
fali światła).
ĆWICZENIE 3  Aktywność enzymatyczna
1. Podział enzymów i  ogólne typy reakcji jakie katalizują.
2. Reakcje katalizowane przez enzymy: ureazy, oksydazy, peroksydazy, katalazy, inwertazy,
amylazy, pepsynę, trypsynę, chymotrypsynę, lipazy.
3. Próby jakościowe wykrywające aktywność: ureazy, oksydaz, peroksydaz, katalazy,
inwertazy, pepsyny.
4. Czynniki wpływające na aktywność enzymatyczną (inhibitory, temperatura, pH).
3
Pracownia z BIOCHEMII dla studentów III roku Wydziału Chemii UA

ĆWICZENIE 4  Kinetyka reakcji enzymatycznej
1. Profil energetyczny dla reakcji katalizowanej enzymatycznie i nie katalizowanej przez
enzym.
2. Wyprowadzenie równania Michaelisa-Menten i Lineweavera Burka dla reakcji
enzymatycznej.
3. Pojęcie: stała Michaelisa (K ).
m
4. Wyznaczanie stałej Michaelisa z wykorzystaniem krzywej Michaelisa-Menten oraz
wykresu Lineweavera-Burka.
5. Wykresy dla reakcji enzymatycznej: stężenie substratu (lub produktu) = f(t),
v = f(stężenie substratu).
max
Literatura:
a) L. Kłyszejko-Stefanowicz :  Ćwiczenia z biochemii PWN.
b) J. Walory, M. Pilarek, M. Kalinowska, H. Jaworowska-Deptuch:  Biochemia. Ćwiczenia
laboratoryjne Wyd. Politechniki Warszawskiej.
c) A. Polanowski:  Laboratorium z biochemii Wyd. Uniwersytetu Wrocławskiego.
d) J. McMurry:  Chemia organiczna PWN.
e) B. Alberts, D. Bray, A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts, P. Walter:  Podstawy biologii
komórki PWN.
f) L. Stryer:  Biochemia PWN.
4