3870137227

32 A EJCHART

Małe białka, M_cz < 10 kDa

Przepisanie sygnałów *H i ident\'fikacja więzów strukturalnych w małych białkach opiera się na dwuwymiarowych widmach TOCS Y (ang. total correlation spectroscopy) [28, 29], COSY (ang. correlation spectroscopy) [30] oraz NOESY (ang. nuclear Oyerhanser effect spectroscopy) [31] i składa się z trzech kroków. Na Rys. 3 przedstawiono schematycznie te obszary widm korelacyjnych, w których znajdują się najważniejsze informacje strukturalne.

H_n, Ar

8 [ppm]

Rysunek 3. Najważniejsze obszary widm TOCSY i NOESY wykorzystywane przy wyznaczaniu struktur

przestrzennych małych białek

Pierwszy' krok całej procedury', to identyfikacja układów spinowych poszczególnych reszt aminokwasowych otrzymana w oparciu o korelacje przekazywane przez wiązania chemiczne. Do tego wykorzystywane są techniki TOCS Y (ang. total correlation spectroscopy) i COSY (ang. correlation spectroscopy). Takie widma dostarczają informacje o przesunięciach chemicznych jąder wchodzących w skład poszczególnych układów spinowych, lecz nie pozwalają rozróżnić reszt tego samego typu (np. dwóch alanin) lub reszt o takiej samej symetrii układu spinowego (np. tyrozyny i kwasu asparaginowego zawierających czterospinowy fragment -NH-CH(CO}-CH,-). Ponieważ protony' aromatyczne i grupa metylowa w metioninie nie są sprzężone z pozostałymi protonami w resztach aminokwasowych, więc na tym etapie ich syg-