3870137242

42 A EJCHART

Duże białka, M >30 kDa

Dotychczas nie opracowano konkretnej strategii otrzymywania kompletnych więzów strukturalnych w dużych białkach. W prowadzonych obecnie badaniach sto* suje się dwa rodzaje zabiegów mających za zadanie poprawę rozdzielczości. Jed* nym jest deuterowanie protonów niewymieniąjących się, co powoduje spowolnienie relaksacji poprzecznej jąder ^l3C prowadzące do zwęzema ich sygnałów o rząd wielkości [27]. Pewnym mankamentem deuterowania jest brak informacji o przesunięciach chemicznych protonów H_ff. Drugim zabiegiem jest stosowanie techniki TROSY (ang. transverse relcaation optimized spectroscopy) [43, 44], wykorzystującej zjawisko interferencji dwóch mechanizmów relaksacji, dipolowej i anizotropii przesunięcia chemicznego, dla jąder ^,5N grup amidowych. Na skutek interferencji składowe nieodsprzęgniętego sygnału korelacyjnego ^!H/^,5N różnią się szerokościami połówkowymi. W technice TROSY rejestruje się jedynie najwęższą składową (Rys. 11).

Rysunek 11 Schematyczne przedstawienie nieodsprzęgniętego sygnału korelacyjnego 'H/^,5N w dużym białku (A) oraz przekroje wzdłuz przerywanych linii (B, Q Składowe różnią się szerokościami połówkowymi ze względu na interferencję mechanizmów relaksacji dipolowej i anizotropii przesunięcia chemicznego

W technice TROSY rejestruje się jedynie najwęższą składową sygnału