628996292

JO

JO

W

a

I

±

IL10-IL12-IL-15

Essai -	LAM

Prelevements apherese

Analyse.

Gradient de Ficoll (si « poły >5% ») +

Purification Par elutri ation

2. i O⁶ cellules/ml Milieu RPMI-AJb Hum 2% GM-CSF1000 U/ml + 11-4(200 U/ml)

Murrocytes

Dendritiąues

immatures

Phagocytose

(durant la nuit = 16 h.)

Maturańon

(6 heures)

Ehitrialeur

¥itesse : 2500 tr/min

Debit 70 ->l 05 ml/4min (pali er s de 5)

Puis 110ml/5 nut

Lymphocytes

Laboratoire de Recherche

Analyse :

♦phenotype

Analyse:

Yalidation l

Nuni/f> nrade CD 14. CEO CD 19, CDP6 TOPKO-3

Laboratoire

ImmunoM

Nxmx Malassez + Coułter TOPRO-3. CD86. CDR3. CD14 CD80. HŁA-DR. HLA-ABC. OMO CCK7, CD208, CD3

Celi Apcpt. AuŁologues (1:1) + KLH (10'Ug/ml)

2.1O⁶ cellules/ml

Miiieu RPMI-Alb Hum 2%

TNFa (40ng/ml)

Poły I:C = AmpUgen = 50pg/ml

Nxmx Malassez + Coułter TOPRa3.CD86.CDR3. CD14 CD80. HŁA-DR. HLA-ABC CD40 CCK7.CD208.CD3

Analyse:

Yalidation 11

Congela&on en pocĄes 5.10⁶ cell/ml 9 0% Alb Hum a 4% i 0% DMSO

$tockage

I i

+

Laboratoire

ImmunoM

J 6

Analyse:

Yalidation Ul

DecongeUtńoHp

+

Laboratoire

ImmunoMon.

Nxnxx Malassez + Coułter TOPRa3. CD86, CD63. CD14 CD80. HŁA-DR. HLA-ABC CDłO CCR7.CDgQ8.CD3

Activation lymphocytaire Ejjicacite cytotordąue sur cellules tumorales autologues

2^10⁶ cellules/ml

/ Matur ation

	en plaques opts w
UTCGpour prep ar ation vaccin	1) Sans cytokine 2) ± CD40-L	5 x pour vaccin (>10*Cell/inj) 1 x test maturation		Laboratoire de Recherche
	J7-)J8^+	1 x stock securite