628996293

JO

JO

%

0

1

Essai -	CHC

Prelevements apherese

Analyse

Gradient de Ficoll (si poły >5%)

	Num łanie
	CD 14
• ^	CD 16
	CD3
<—	T0P^O3

cvtes

Purification Par elutriation

Vitesse : 2500 tr/min

Debit 70-Pi 05 mi/4min (paliers de 5)

Puis 110ml/5 mu

Lymphocytes

Laboratoire de Recherche

NutfiP otrfies^250ml_^ (100 i 120ml) ^a

%

IL1ML12-IL-15

2.10^Ó ceiiuies/mi Miiieu RPMI-AIb Hum 2% GM-CSF1000 U/mt + IL-4 (200 U/mi)

Monpcytes

Dendntiąues

immatures

Miiieu RPMI-AIb Hum 2% GM-CSF(1000 U/mi)

IL-4 (200 U/mi)

TNFa (i OOOU/mi)

Poiy PC = Ampiigen = 50/ng/mi

J 6

^ Analyse : •pkenotype^*

Analyse :

Validation l

Numfcnnule

CD14.CD3

CD19,CD66

TOPRO-3

Laboratoire

ImmunoM

KLH

Num Malassez + Coułfer TOPRO-3. CD86. CDE3. CD14 CD80. HLA-DR. HLA-ABC. CDtt) CCK7, CD208, CD3

Maturańon

(16 heures ou « overnight »)

Analyse

*pkenotype

CD 14, CD80, HLA-DR + .*BC %CeIL TOafcfes, CE86, CD63, CD209

Laboratoire ImmuitoM

Num Malassez + Couber TOPRa3.CD86.CDg3. CD14 CD80. HLA-DR. HLA-ABC. CD40 CCK7.CDgQ8.CD3

J 6

Analyse :

Validation III

Laboratoire ImmunoMon.

Congelańd^* 5.10⁶ ceiiuies/mi 90% Alb Hum 4%

10% DMSO

Stockage ^' f*

J 7 ou +

UTCGpour preparation vaccin

Decongelańon

/chargement peptides (2.10^ó/mi,2h, 4*C) en tubes separes/pept.

	+	Tir	+
					p
U		IaaA>		u

4 xpour vaccin +1 pour test

Activation lymphocytaire Ejjicacite cyŁotordąue sur cellules tumorales autołogues

Laboratoire de Recherche pour preparation ImmunoM