7334803286

h)    Podłoże dla bakterii wiążących azot

Skład: woda, mannitol, K2HPO4, KH2PO4, MgSOł, NaCl, CaCO.3, ślady MnSC>4, FeCh, Na2Mo04.

i)    Podłoże Davisa z różnymi źródłami azotu

Zmieszać ze sobą:    40 ml bezazotowych soli Davisa

4 ml 20% glukozy

2 ml roztworu zawierającego źródło azotu 150 ml agaroidu

Źródła azotu to: 10 % roztwór NH4CI 10 % roztwór KN0₃ 20 % roztwór hydrolizatu kazeiny

2, Źródła węgla i eneręii

a)    Określenie typu pokarmowego badanych szczepów

Szczepy    Podłoża

Bacillus subtilis    podłoże mineralne AB

Halothiobacillus neapolitanus    agar odżywczy

Paracoccus versutus Micrococcus luteus

-Płytkę z podłożem AB i z agarem odżywczym podzielić na 4 sektory i odpowiednio podpisać.

-    Każdy ze szczepów wysiać rysą na oddzielnych sektorach obu podłoży.

-    Po inkubacji w temperaturze pokojowej określić typ pokarmowy badanych bakterii.

Zmiana barwy podłoża AB z czerwonej na żółtą świadczy o jego zakwaszeniu.

b)    Badanie zdolności bakterii heterotroficznych do wykorzystywania różnych organicznych źródeł węgla

Szczepy    Podłoża

Escherichia coli    agar odżywczy    ze skrobią

Bacillus subtilis    agar odżywczy    z mlekiem

Pseudomonas fluorescens    agar odżywczy    z    tłuszczem

-    Płytki z pożywkami podzielić na pół, odpowiednio podpisać i zrobić posiewy:

-    na agar odżywczy z mlekiem i ze skrobią posiać rysą B. subtilis i E. colt,

-    na agar odżywczy z tłuszczem posiać rysą E. coli i P. fluorescens;

-    Na jeden słupek z żelatyną odżywczą wsiać igłą B. subtilis, a na drugi E. coli.

-    Pozostałe posiewy inkubować w temperaturze pokojowej przez kilka dni.

Odczyt posiewów po inkubacji:

-    Płytki z agarem odżywczym i skrobią należy zalać płynem Lugola. Brak fioletowego zabarwienia wokół strefy wzrostu bakterii świadczy o rozkładzie skrobi.

-    Na agarze odżywczym z mlekiem obserwuje się przejrzyste strefy wokół linii wzrostu

szczepów hydrol i żujących kazeinę.

-    Płytki z agarem odżywczym i tłuszczem należy zalać 20% roztworem CUSO4. Pojawienie się szmaragdowego zabarwienia wokół linii wzrostu świadczy o rozkładzie tłuszczu.

12