7921506539

mikrofalowego (modyfikując moc 50-600 W i czas 0,5 lub 1 min) podczas wstępnej obróbki surowców roślinnych do zwiększenia aktywności przeciwutleniającej ekstraktów.

W drugim etapie oszacowano biodostępności związków fenolowych w symulowanym układzie pokarmowym człowieka. Doświadczenia wykonano na roztworach modelowych wybranych polifenoli (kwas ferulowy, kwas p-kumarowy, (+)katechina, kwercetyna, hesperetyna i hesperydyna) oraz na owocach różnych gatunków roślin, uznawanych za bogate źródło przeciwutleniaczy. Oceniono także różnice w biodostępności polifenoli z owoców i ich ekstraktów. Zastosowano następujący model trawienia: próbki roztworów polifenoli, owoców lub ich ekstraktów zakwaszano do pH 2 (HC1), dodawano roztworu pepsyny i inkubowano (37°C, 2 h). Następnie zobojętniano (NaHCO.^), dodawano roztworu pankreatyny i żółci, inkubowano (37°C, 4 h) i wirowano (1380^xg, 10 min). Supematanty zlewano, pozostałości przepłukiwano dwa razy wodą redestylowaną, za każdym razem mieszając i wirując, a supematanty łączono. Pozostałości po wirowaniu (osad) wykorzystywano później do symulacji trawienia w jelicie grubym. Supematanty przenoszono do worków dializacyjnych i wytrząsano w buforze PBS (37°C, 3 h). Zawartość worków (retentat) łączono z osadem pozostałym po wirowaniu (z wcześniejszego etapu trawienia), alkalizowano do pH 8 i zaszczepiano inokulum zawierającym mieszaninę jelitowych bakterii (Bacteroides galacturonicus, Enterococcus caccae, Bifidobacterium catenulatum, Ruminococcus gauvreauii, Lactobacillus sp., Escherichia coli), inkubowano (37°C, 16 h) i wirowano. Po przeprowadzonym procesie trawienia uzyskano następujące frakcje:

•    supematant - frakcja rozpuszczalna związków polifenolowych, trawiona w żołądku i dwunastnicy, powstała po żwirowaniu próbki poddanej trawieniu enzymatycznemu,

•    osad - frakcja nierozpuszczalna związków polifenolowych poddawanych trawieniu w żołądku i dwunastnicy, będąca pozostałością po żwirowaniu próbki poddanej trawieniu enzymatycznemu,

•    retentat - frakcja rozpuszczalna związków polifenolowych, które nie migrują przez membranę dializacyjną,

•    permeat - bufor PBS zawierający składniki, które przeszły przez membranę dializacyjną,

•    pozostałość po fermentacji - frakcja związków polifenolowych, która pozostała z osadu i retentatu po trawieniu bakteryjnym w jelicie grubym.

5