8009766947

OH H

alkaliczna fosfataza

(C)

alkaliczna fosfataza

5’pDNA lub 5’pRNA -► 5’ _OHDNA lub 5’_0HRNA

Ryc. 2.1 Usuwanie grupy 5'fosforanowej DNA/RNA. (A) struktura nukleotydu, zaznaczono usuwaną grupę fosforanową; (B) i (C) reakcja defosforylacji.

Insert OH

OH

_DH    P_

P    OH

wektor nie poddany działaniu alkalicznej fosfatazy może ulegać ponownej cyrkułaryzacj i, co prowadzi do otrzymania dużej ilości „pustych” wektorów

P

defosforylowany wektor nie może ulec cyrkularyzacji, bez insertu

Ryc. 2.2 Schemat klonowania insertu (powstałego po trawieniu enzymem restrykcyjnym) do defosforylowanego wektora.