Slajd 1
Układ odpornościowy
a przeszczepy komórek i tkanek
Barbara Zamorska
Slajd 2 1.aktywacja T przez komórki APC
Mechanizm allorozpoznania, aktywacja komórek T biorcy
Bezpośrednia prezentacja antygenu
dawcy, np.. komórki pasażerskie, limf.
MHC CD8 2. Aktywacja T poprzez
APC dawcy, białko
dawcy
T biorcy
prezentację na własnych APC
peptyd
(infiltrujÄ…ce
Pośrednia prezentacja antygenu
przeszczep) peptydów dawcy ze
APC biorcy
MHC
białko
biorcy
szczególnym uprzywilejowaniem
T biorcy
Peptyd dawcy
peptydów z cząsteczek MHC
(fragment
białek MHC
dawcy)
dawcy.Allorektywność T może
dotyczyć również innych peptydów i
małych antygenów HLA - mHAgs
Ścieżka stymulacji przez różne antygeny i ich epitopy jest poza ingerencją antygenowo swoistą, natomiast drugi sygnał  kostymulacja
Slajd 3 Optymalna i całkowita aktywacja
może być obiektem immunomodulacji.
komórek T przez CD28 i dwa ligandy
B7-1 (CD80) i B7-2 (CD86) promuje
max produkcjÄ™ cytokin i proliferacjÄ™ T
chroniąc je od anergii i śmierci,
szczególnie naiwne T.CD40 na APC
wchodzi w interakcje z CD40L na
CD4 i CD8 i indukuje produkcjÄ™
cytokin przez DCs i uruchamiajÄ… B i
CD28 stymulacjÄ™ T.
Apoptoza i nekroza w odrzucaniu przeszczepu. Śmierć komórek przeszczepu jest nekrotyczna w naturze, komórki immunologiczne efektorowe
ulegają apoptozie a mechanizm tej apoptozy kontroluje wielkość i naturę odpowiedzi alloreaktywnej komórek T.
Slajd 4 Nekroza uwalnia cytoplazmatyczne
białka np..hsp z 5% rosną do15% i
wiążą się z CD91 na APC, który to
kompleks jest prezentowany dalej CD4
i CD8, a poza tym DC dojrzewajÄ…
wypuszczajÄ…c cytokiny i chemokiny.
Apoptoza, aktywacja indukujÄ…ca
śmierć komórki AICD i powstanie
E. Chiffoleau, P.T.Walsh, L.Turka komórek pamięci.
Slajd 5
Apoptozaindukuje immunoregulacjÄ™
indukuje immunoregulacjÄ™
Apoptoza
" Komórki umierające w procesie apoptozy lub f
" Komórki umierające w procesie apoptozy lub faagocytoza takich komórek uwalnia IL-10 i
gocytoza takich komórek uwalnia IL-10 i
TGF-².
TGF-².
" Obie te cytokiny ułatwiają różnicowanie i ekspansję komórek regulatorowych.
" Obie te cytokiny ułatwiają różnicowanie i ekspansję komórek regulatorowych.
" Obie cytokiny hamujÄ… dojrzewanie DCs w typ prozapalny blokujÄ…c expresjÄ™ czÄ…steczek
" Obie cytokiny hamujÄ… dojrzewanie DCs w typ prozapalny blokujÄ…c expresjÄ™ czÄ…steczek
kostymulujÄ…cych i produkcjÄ™ IL-12.
kostymulujÄ…cych i produkcjÄ™ IL-12.
" Strategia utzymania komórek DC w stanie nieaktywnym poprzez blokowanie NF-ºÅ‚
" Strategia utrrzymania komórek DC w stanie nieaktywnym poprzez blokowanie NF-ºÅ‚
hamuje regulacjÄ™ przez MHC II i czÄ…steczki kostymulacyjne.
hamuje regulacjÄ™ przez MHC II i czÄ…steczki kostymulacyjne.
Slajd 6
Wynik Transplantacji
Wynik Transplantacji
Dobry:
Badanie aktywności procesów biologicznych
prowadzÄ…cych do tolerancji u biorcy.
Konieczność wprowadzenia nowych testów
indukujÄ…cych immunologicznÄ… tolerancjÄ™ na swoiste antygeny
dawcy, pozwalajÄ…cych na zredukowanie lub wycofanie siÄ™ z
immunosupresji.
Slajd 7 Fenotyp tolerancji
Fenotyp tolerancji
Mechanizm tolerancji:
a) tolerowanie  swego b) tolerowanie transplantu
Immunologiczna tolerancja:
-delecja grasicza  tolerancja centralna
-delecja na obwodzie  anergia lub supresja
Slajd 8
Tolerancja centralna- zarodek, noworodek
Delecja
klonalna Sekwestracja lub ignorancja
Delecja klonalna
obwód Anergia
grasica
Limfocyt Limfocyty supresorowe-aktywna supresja,
autoreaktywny przeciwciała antyidiotypowe
Slajd 9 Mechanizm tolerancji transplantu (centralny) NIMA non inherited maternal HLA
Mechanizm tolerancji transplantu (centralny)
Chimery szpikowe  APC dawcy po przejściu do grasicy wpływają
antigen, IPA inherited paternal HLA
na negatywną selekcję limfocytów T biorcy.
antigens Po porodzie komórki matki i
Mikrochimeryzm 
Przeszczep małej ilości komórek dawcy
DNA jej sa długo obecne we krwi i
Ważne jest anatomiczne miejsce tego mikrochimeryzmu i sposób
jego wykrycia.
organach limfoidalnych W mleku sÄ…
Mikrochimeryzm hematopoetyczny płodu / matki -komórki NIMA,
matki / płodu  komórki IPA
rozpuszczalne antygeny matki
Tolerancja z mikrochimeryzmem zależy od dojrzałości układu
immunologicznego i stopnia antygenowości przeszczepu, ale nie
zapobiega odrzutowi.
Slajd 10 NK mają dwa typy receptorów-kiler
immunoglobulin KIR i ligandy dla
Komórki B-mają również znaczenie dla tolerancji
Komórki B
" ulegają klonalnej delecji lub anergii w zależności od MHC kl I. Pojawiaja się najszybciej po
powinowactwa receptora antygenu komórki B i natury tego
antygenu, tracÄ… receptory dla chemokin.
przeszczepie i przewazaja przez trzy
" w szpiku rośnie ilość B1 CD5+ które wytwarzają przeciwciała o
małym powinowactwie ale wielospecyficzne.
miesiÄ…ce sÄ… cytotoksyczne i wydzielajÄ…
" zmniejsza się ilość receptorów biorących udział w kostymulacji
z komórkami T.
cytokiny, wzmagajÄ… efekt anty
Komórki NK alloreaktywne
leukemia. Ich geny dla KIR sÄ… na
NKG2D ligandy  duża ich ilość oraz polimorfizm
chromosomie 19 i mogÄ… siÄ™ inaczej
Rodzina genów MIC- związanych z obszarem MHC
dziedziczyć niż HLA. Mogą niszczyć
tkanki biorcy. Mogą mieć efekt
cytotoksyczny nie poddajÄ…cy siÄ™
restrykcji MHC. Ale reagujÄ… na
dimorfizm asp/lis HLACw są również
w szpiku i tkankach dawcy.
Populacje komórek regulatorowych
Slajd 11
fenotyp nazwa funkcja mechanizm działania
CD4+CD25+ Naturalne Homeostaza, ochrona przed Bezpośredni kontakt
komórki autoimmunizacją
regulatorowe,
i nadwrażliwością.
Trn
CD4+ Th1* Regulacja kom.Th2 IFN-Å‚
CD4+ Th2* Regulacja kom.Th1 Il-4
CD4+ TH3 inaczej TR2 Tolerancja pokarmowa i nosowa, TGF-beta
przeciw autoimmunizacji
CD4+ TR1 Chroni własne tkanki przed Il-10
atakiem limfocytów TH
CD8+ TR1 lub TR2 indukcja tolerancji pokarmowej? Il-10/TGF-beta
CD8+CD25+ CD8+CD25+ Podobnie jak Trn Bezpośredni kontakt
TGF-²
CD8+CD28- TS Wyciszanie odpowiedzi Interakcja z ligandem
immunol. Modulacja DC na DC
CD4-CD8- DN Hamowanie limfocytów CD8+, Fas-FasL
TCRÄ…² zapobieganie odrzucaniu przesz.
TCRÄ…²+NK1.1+ NKT Tolerancja obwodowa, dziaÅ‚anie Il-4, IFN-Å‚, TGF-²
cytotoksyczne-przeciwnowotw.
TCRÅ‚´ TCRÅ‚´ Supresja odpowiedzi przeciw- Il-10,TGF-²
nowotworowej i zakaz
nej
Ciąża
Ciąża
Slajd 12
Komórki T regulatorowe w łożysku ludzkim
" fenotyp CD4+CD25+ (14%),
" wewnątrz komórki dużą zawartość CTLA-4
" mają zdolność hamowania produkcji IL2 i proliferacji T CD4+,
CD8+
" mają również marker  GITR- indukowany przez
glukokortykoidy receptor TNF
Ilość tych komórek rośnie w krwi obwodowej kobiet podczas
pierwszego i drugiego kwartału ciąży.
Ekspansja Trn w ciąży nie jest antygenowo swoista i jest
prawdopodobnie zwiÄ…zana ze zmianami hormonalnymi.
Slajd 13 Ciąża
Ciąża
Komórki CD14+ - makrofagi z fenotypem immunoinhibitora,
produkujÄ… spontanicznie IL-10, majÄ… ekspresjÄ™ HLA DR, lecz za
niski poziom czÄ…steczek kostymulujÄ…cych CD80/CD86,
.
W łożysku jest też pewna ilość niedojrzałych komórek DCs
blokujących proliferację T komórek.
Inne błony wyścielające : płuca, jelito z DCs uwalniającymi IL-10 i
TGF-ß wpÅ‚ywajÄ… na różnicowanie Treg?
Slajd 14 Strategia kreowania tolerancji
Strategia kreowania tolerancji
Czy tolerancja jest permanentna, w jakim czasie powinna siÄ™
pojawić?
Badania ustalajÄ…ce  stan tolerancji
1. In vitro  badanie pośredniej i bezpośredniej alloreaktywności T:
ELISpot  Th1,Th2,Tr-1, Treg?
2. Analiza cytokin komórek T: real  time PCR
3. Badanie anergii, apoptozy , obecności komórek regulujących
4. Badanie odpowiedzi humoralnej: potransplantacyjne
monitorowanie anty HLA Ab : ELISA lub cytometr
5. Badanie immunohistochemiczne i morfologiczne przeszczepu:
biopsja.
6. Intragraft: profil badania krwi i moczu, DNA dawcy w ostrym
odrzucaniu, mRNA białek perforyn i granzymu?
7. Polimorfizm genów regulujących produkcję cytokin
i mediatorów T limfocytów.
8. Obecność  genów tolerancji :gene chip microarrays
9. Badanie białek?
Slajd 15 Strategia tolerancji u człowieka-
Strategia tolerancji u człowieka-
Historycznie  utrzymano przeszczep- 5-12 lat bez immunosupresji
Eliminuje się immunosupresję w przeszczepie organów wykonując
wcześniej przeszczep szpiku od tego samego dawcy.
Kreuje się chimerę która ułatwia tolerancję transplantu w
mechanizmie zbliżonym do centralnej tolerancji.
Nowe protokoły dla chimer zawierają użycie leków : sterydów,
cytostatyków , immunosupresji, immunomodulatorów, przeciwciał
monoklonalnych, naświetlań grasicy , całego układu limfoidalnego,
komórek CD34+, transfuzji komórek krwiotwórczych krwi.
Blokuje się kostymulację limfocytów T,
Doprowadza się do deplecji komórek na obwodzie.