Temat: Mikrorozmnażanie

in vitro.

Daria Pietryga

Sylwia Pietrulińska

Martyna Pojawa

Cel zadania: Ocena wpływu
wybranych regulatorów wzrostu
na mikrorozmnażanie różnych
eksplantatów wierzby wiciowej.

Roślinne kultury tkankowe in
vitro- hodowla roślin, części
roślin, tkanek lub pojedynczych
komórek na sztucznych pożywkach
w sterylnych warunkach.

Totipotencja-

zdolności

do

odtworzenia poszczególnych, a nawet
całej rośliny z pojedynczej komórki.
Gdy komórkę tę odłączy się od
wpływu całego organizmu, zawarta w
niej informacja genetyczna może
zostać uruchomiona i wykorzystana
w określony sposób.

Mikrorozmnażanie(rozmnaża
nie

klonalne)-

pozwala

rozmnożyć w warunkach in vitro
materiał roślinny z niewielkich
fragmentów roślin, tkanek lub
pojedynczych

komórek

i

otrzymać tym sposobem dość
dużą

ilość

sadzonek

w

stosunkowo krótkim czasie

Eksplantat- wyodrębniony
fragment tkanki lub narządu użyt
y do zapoczątkowania kultury in
vitro. Wyróżniamy:
-eksplantat pierwotny- materiał
wyjściowy do kultury in vitro,
wykładany na pożywkę
-eksplantat wtórny- fragment
rośliny lub tkanki pochodzący z
kultur in vitro i użyty do
zapoczątkowania nowej kultury.

Reakcja obiektu umieszczonego na
pożywce:
-kontynuacja naturalnego wzoru
rozwojowego, zgodnego z kompetencjami
tkanki czy organu rośliny

-zmiana naturalnego wzoru
rozwojowego, która może nastąpić w
sposób spontaniczny lub po
zastosowaniu określonych
fitohormonów w różnych kombinacjach
i stężeniach

Najczęściej stosowane kultury
in vitro:
-kultury kalusa
-kultury merystemów
-kultury protoplastów
-kultury zawiesin komórkowych
-kultury pylników, mikrospor i
niezapłodnionych zalążków lub
zalążni
-kultury zarodków(dojrzałych i
niedojrzałych)

Czynniki, od których zależy wynik
kultury in vitro:

1. Wewnętrzne(związane bezpośrednio z
eksplantatem):

*genotyp rośliny, dawcy
eksplantatu(rodzaj, gatunek, odmiana)
*rodzaj organu, tkanki oraz jego wielkość
oraz stopień zróżnicowania eksplantatu
*stan fizjologiczny rośliny dawcy
eksplantatu
*wiek rośliny dawcy eksplantatu

2. Zewnętrzne:

*światło- spektrum,
natężenie, cykl dobowy
*temperatura
*pożywka

Materiał niezbędny do
wykonania ćwiczenia:
-siewki wierzby wiciowej
-pożywki:
A. MS +2 mg/l BAP
B. MS +2 mg/l kinetyny
C. MS bez regulatorów wzrostu

Metodyka:
1. Pobranie próbek ze sterylnej
kultury.
2. Umieszczenie na pożywce po 3
eksplantaty wierzchołkowe oraz
po 5 eksplantatów z
merystemami bocznymi.
3. Zakręcone słoiki umieścić w
fitotronie w temperaturze 24 st. C
na 5 tygodni.

Wyniki: + zdjęcia

Wnioski końcowe: