uzyskanie wysokocz

ą

steczkowego DNA przy

jednoczesnym oczyszczeniu preparatu DNA
z białek i inhibitorów enzymów

reakcja PCR (Polymerase Chain Reaction)

klonowanie

sekwencjonowanie

transformacja bakterii

transfekcja komórek

analiza restrykcyjna

bakterie

komórki ro

ś

lin

komórki zwierz

ą

t

komórki człowieka

- krew obwodowa (limfocyty)
- komórki płynu owodniowego (AFC)
- komórki kosmówki (CVS)
- hodowle fibroblastów

- hodowle fibroblastów
- komórki epitelialne
- cebulki włosów
- plamy krwi, nasienia
- fragmenty tkanek
- szpik kostny

izolacja DNA z zastosowaniem fenolu
i chloroformu w celu odbiałczenia preparatów

izolacja DNA przebiegaj

ą

ca przez wysolenie

białek z lizatów komórek

izolacja DNA przez zwi

ą

zanie z no

ś

nikiem,

odmycie zanieczyszcze

ń

i uwolnienie DNA

liza komórek w celu preparacji j

ą

der komórkowych

dezintegracja otoczki j

ą

drowej (metody fizyczne, chemiczne

lub mechaniczne)

oczyszczenie DNA - oddzielenie DNA od innych struktur
komórkowych, cz

ą

steczek RNA i białek zwi

ą

zanych z DNA

wytr

ą

cenie DNA alkoholem: etylowym lub izopropylowym

1) namno

ż

enie hodowli bakteryjnej

2) liza bakterii w

ś

rodowisku alkalicznym (pH 12)

2) liza bakterii w

ś

rodowisku alkalicznym (pH 12)

3) oczyszczenie plazmidowego DNA –
zastosowanie mieszaniny fenol:chloroform

zastosowanie izotiocyjanian guanidyny -
zwi

ą

zek chaotropowy słu

żą

cy do denaturacji

białek

białek

oczyszczenia DNA z białek – zastosowanie
mieszaniny fenol:chloroform