Azot w wiekszosci wystepuje w zwiazkach organicznych.Azot mineralny moze znajdowac sie w roztworze glebowym , zaadsorbowany wymiennie oraz niewymiennie w kompleksie sorpcyjnym.Na niewymienna sorpcje jonow amonowych wplywaja antagonistycznie jony K+ oraz czasteczki zwiazkow organicznych ktore zmniejszaja jej rozmiary.Sorpcja niewymienna ma wieksze znaczenie w glebach wytworzonych z pylow-madach i lesach.

Duza czesc azotu w glebie rozklada sie przy kwasnej hydrolizie do aminokwasow.Dalo to podstawe do sformulowaania hipotezy o bialkowych wlasciwosciach organicznego azotu w glebie.Stwierdzono takze ze pewna ilosc azotu organicznego wystepuje w formie amidow kw.nukleinowych oraz polaczen heterocyklicznych takich jak np puryna


ZASADA METODY :

Probke gleby traktuje sie H2SO4.w tych warunkach do roztworu przechodzi zarowno azot mineralny bezposrednio dostepny dla roslin jak i azot polaczen organicznych ,ktore latwo ulegaja rozkladowi.W otrzymanym wyciagu oznacza sie azot metoda destylacyjna po przeprowadzeniu wszystkich jego polaczen w forme amonowa.

Redukcji azotanow do amoniaku dokonuje sie wodorem atomowym wytworzonym podczas gotowania roztworu glebowego z dodatkiem mieszanki redukujacej skladajacej sie z metalicznego FE i ZN

h2so4 + Fe = feso4 +2h
h2so4 + zn = znso4 +2h
hno3 + 2h = hno2 + h20
hno2 + 6h = nh3 + 2h20
2nh3 + h2so4 = (nh4)2so4


Azot organiczny glownie amidy i aminokwasy przeprowadza sie w forme amonowa pod wplywem h2so4 i k2cr2o7 jako utleniacza
Amidy w srodowisku kwasnym latwo ulegaja hydrolizie przy czym powstaja odpowiednie kwasy organiczne oraz amoniak ;amoniak wiaze sie natychmiast z nadmiarem kwasu siarkowego a kwas organiczny pod wplywem dichromianu potasu utlenia sie do dwutlenku wegla i wody

R-CO-NH2 + H20--h2so4-->R-CO-OH + NH3

Dichromian utlenia takze aminokwasy przy czym jednoczesnie zaachodzi reakja ich zdeaminowania.Chrom redukuje sie do trojwwartosciowego ,co prowadzi do zmiany z oranzowego zabarwienia na zielone

R-CH(NH2)-COOH + K2CR2O7 + h2SO4 -->CR2(SO4)3 + (nh4)2So4 + k2so4 +co2 + h2o

Oznaczenie w wyciagu glebowym metoda destylacyjna polega na rozlozeniu soli amonowych roztworem NAOH przy czym wydziela sie amoniak:

(NH4)2SO4 + 2naoh = 2nh3 + na2so4 + 2h2o

Wydzielony NH3 oddestylowuje sie w aparacie PARNASA WAGNERA i wiaze w odbieralniku roztworem H3BO3:

3NH3 + H3BO3 = (NH4)3BO3

Po zakonczonej destylacji roztwor w odbieralniku miareczkuje sie mianowanym kwasem siarkowym wypierajac z boranu amonu amoniak:

2(NH4)3BO3 +3h2so4 = 3 (nh4)2so4 + 2h3bo3

Z ilosci H2SO4 zuzytego do miareczkowania oblicza sie zawartosc azotu w wyciagu glebowym