Sprawozdanie

Temat: Hodowla Drosophila melanogaster

Cel: Eksperymentalna ocena mechanizmów dziedziczenia cech szczepów użytych do krzyżówek

1. Szczepy wybrane do krzyżówki

Normal- szczep dziki, mający czerwone oczy oraz normalnie rozwinięte skrzydła.

White nubbin- podwójny mutant gatunku Drosophila Melanogaster, który fenotypowo wyróżniają białe oczy oraz zredukowane skrzydła.

1. Przebieg hodowli

Tydzień 1 (19.11.14r)

Do hodowli wybieramy dwa różne szczepy owocówek white nubbin oraz normal. Przygotowujemy dwadzieścia penicylinówek (po 10 na każdy szczep), do każdej wprowadzamy delikatnie po jednej larwie każdego szczepu, a następnie szczelnie zamykamy i oznaczamy pojemniczki. Pozostawiamy je w temperaturze optymalnej do prowadzenia hodowli, tj. 25°C.

Tydzień 2 (26.11.14r)

Po tygodniu, po przepoczwarzeniu oznaczamy płeć żywych owocówek. Przygotowujemy dużą butelkę z pożywką agarową i krążkiem bibuły, a następnie wpuszczamy do niej jedną samicę white nubbin i dwóch samców normal. Butelkę zamykamy i pozostawiamy w optymalnej do prowadzenia hodowli temperaturze.

P: 1 nnX^W X^W x 2 NN X^N Y

	NX^N	NY
nX^W	Nn X^N X^W	Nn X^WY
nX^W	Nn X^N X^W	Nn X^WY

Rys.1 Przewidywane genotypy pokolenia F1, krzyżówka genetyczna

Tydzień 3 (3.12.14r.)

Z butelki wypuszczamy osobniki rodzicielskie i pozostawiamy w niej umieszczone na ściankach larwy. Następnie zostawiamy w temperaturze 25°C i oczekujemy pojawienia się imago pokolenia F1.

Tydzień 4 (10.12.14r.)

Po przepoczwarzeniu, wszystkie dorosłe owady przenosimy do nowych butelek, na świeże pożywki, pamiętając o pozostawieniu hodowli w odpowiedniej temperaturze.

Tydzień 5 (17.12.14r.)

Pokolenie F1 przenosimy do butelki bez pożywki i zamrażamy, aby móc policzyć osobniki i określić ich fenotypy.

Otrzymane wyniki pokolenia F1- fenotypy:

16 samców 100% czerwone oczy, normalne skrzydła

20 samic 100% czerwone oczy, normalne skrzydła

Jednocześnie przystępujemy do prowadzenia dalszej hodowli pokolenia F2. W tym celu, po usunięciu z butelki pokolenia F1, pozostawione w niej larwy szczelnie zamykamy i odstawiamy na kolejny tydzień.

P: Nn X^N X^W x Nn X^WY

	N X^W	N Y	n X^W	n Y
N X^N	NN X^NX^W	NN X^NY	nn X^N X^W	nn X^NY
N X^W	NN X^WX^W	NN X^WY	nn X^WX^W	nn X^WY
n X^N	Nn X^NX^W	Nn X^NY	nn X^N X^W	nn X^NY
n X^W	Nn X^WX^W	Nn X^WY	nn X^WX^W	nn X^WY

Rys.2 Przewidywane genotypy pokolenia F2, krzyżówka genetyczna

Tydzień 6 (7.01.15r.)

Zamrażamy pokolenie F2, a następnie określamy fenotypy wszystkich osobników oraz liczbę samców i samic w każdej klasie fenotypowej.

Z hodowli otrzymano:

35♂ białookich w tym 4♂ bezskrzydłych

44♂ czerwonookich w tym 4♂ bezskrzydłych

87♀ czerwonookich w tym 19♀ bezskrzydłych

Wyniki doświadczenia:

Butelka nr 2. 1♀ normal x 2♂ white nubin

Krzyżówki teoretyczne:

Legenda:

Oznaczenie	Fenotyp
	czerwonookie
	Czerwonookie bez skrzydeł
	białookie
	Białookie bez skrzydeł

P: ♀X^AX^ANN x ♂X^aYnn

F1:

♀ ♂	X^AN	X^AN
X^an	X^AX^aNn	X^AX^aNn
Yn	X^AYNn	X^AYNn

Wszystkie muszki z pokolenia F1 mają fenotyp normal.

∖nF1 :          X^AX^aNn

F2:

♀ ♂	X^AN	X^An	YN	Yn
X^AN	X^AX^ANN	X^AX^ANn	X^AYNN	X^AYNn
X^An	X^AX^ANn	X^AX^Ann	X^AYNn	X^AYnn
X^aN	X^AX^aNN	X^AX^aNn	X^aYNN	X^aYNn
X^an	X^AX^aNn	X^AX^ann	X^aYNn	X^aYnn

Stosunek fenotypowy:

Płeć fenotyp	♀	♂	suma
czerwonookie	6	3	9
Czerwonookie bez skrzydeł	2	1	3
białookie	0	3	3
Białookie bez skrzydeł	0	1	1

Nasze muszki:

o - wartość obserwowana, e - wartość oczekiwana, d - odchylenie

F1:

	♀	♂	Suma x^2 ♀+ ♂
	o	e	d
czerwonookie	20	18	2
białookie	0	0	0
suma	20	18	x^2
Suma ♀+♂	36

Ilość stopni swobody = 3

Poziom istotności = 0,05

x² = 7, 815

7,815>0,44

Wartość obliczona niższa od krytycznej.

Rozkład zgodny z rozkładem Mendla

F2:

	♀	♂	Suma x^2 ♀+ ♂
	o	e	D
czerwonookie	68	62	6
białookie	0	0	0
Czerwonookie bezskrzydłe	19	21	-2
Białookie bezskrzydłe	0	0	0
suma	87	83	x^2
Suma ♀+♂	166

Liczba stopni swobody=7

Poziom istotności= 0,05

x²=14,067> 12,31 wartość krytyczna wyższa od obliczonej.

Rozkład jest zgodny z rozkładem Mendla

Butelka 1. – 2♀whitenubbin x 2 ♂ normal

Krzyżówki teoretyczne:
P: ♀X^aX^ann x ♂ X^AYNN

F₁:

♂ ♀	X^an	X^an
X^AN	X^AX^aNn	X^AX^aNn	Samice
YN	X^aYNn	X^aYNn	Samce

symbol	fenotyp
	Normal
	Nubbin
	White
	White nubbin

Wszystkie muszki z pokolenia F₁ maja normalne skrzydła, wszystkie samice mają oczy czerwone, a samce białe
F₂ :   X^AX^aNn x ♂ X^aYNn

♂ ♀	X^AN	X^An	X^aN	X^an
X^aN	X^AX^aNN	X^AX^aNn	X^aX^aNN	X^aX^aNn	Samice
X^an	X^AX^aNn	X^AX^ann	X^aX^aNn	X^aX^ann
YN	X^AYNN	X^AYNn	X^aYNN	X^aYNn	Samce
Yn	X^AYNn	X^AYnn	X^aYNn	X^aYnn

Stosunek fenotypowy:

fenotyp płeć	Samice♀	Samce♂	Suma
normal	3	3	6
white	3	3	6
nubbin	1	1	2
white-nubbin	1	1	2

	Samice	Samce	Suma x^2
	o	e	d
normal	9	13	-4
white	0	0	0
nubbin	0	0	0
white-nub	0	0	0
SUMA	9	13	x^2
Suma ♀+♂	26

Liczba stopni swobody: df=4-1=3
Poziom istotności= 0,05

x²_{α = 0, 05}=7,185>2,46154 --» wartość niższa od wartości krytycznej x²
Rozkład zgodny z rozkładem Mendla

F₂ :  

	Samice	Samce	Suma x^2
	o	E	d
normal	28	24	4
white	19	24	-5
nubbin	4	7	3
white-nub	10	8	2
SUMA	61	63	x^2
Suma ♀+♂	126

Liczba stopni swobody df=7
Poziom istotności= 0,05

x²=14,067>11,31 --» wartość niższa od wartości krytycznej x²

Rozkład zgodny z rozkładem Mendla.

Wnioski:

Rozkład cech fenotypowych jest zgodny z założeniami krzyżówek teoretycznych. Biała barwa oczu spowodowana jest obecnością allela recesywnego, położonego na chromosomie X -jest cechą sprzężoną z płcią(u samic dwa allele recesywne” aa” u samców „a”). Brak skrzydeł determinowany jest obecnością dwóch alleli recesywnych w autosomach i cecha ta dziedziczona jest wg praw Mendla.