27.11.2010	ANALIZA LEKÓW
Ćwiczenie nr 7	SPEKTROFOTOMETRIA – OZNACZANIE TOŻSAMOŚCI I ZAWARTOŚCI RYBOFLAWINY	Ocena:
Prowadzący:

1. Cel ćwiczenia:

Celem ćwiczenia było oznaczenie tożsamości i zawartości wybranego surowca farmaceutycznego

1. Zasada oznaczenia:

Pomiar absorpcji promieniowania.

1. Aparatura i odczynniki:

Tabletka ryboflawiny, kwas octowy 16g/l, woda oczyszczona, wodorotlenek sodu 4g/l, kolba miarowa o pojemności 200 ml, łaźnia wodna, bagietka.

1. Opis wykonania:

• Tabletkę ryboflawiny zmikronizowałem w moździerzu i odważyłem 0,14 masy proszkowej co odpowiada 2 mg czystej ryboflawiny i przeniosłem do kolby miarowej.

• Dodałem 30 ml kwasu octowego 16g/l ogrzewając na łaźni wodnej przez 30 minut.

• Dodałem 140 ml wody oczyszczonej, a następnie 6 ml roztworu wodorotlenku sodu 4g/l i uzupełniłem wodą do kreski.

• Zmierzyłem absorpcję roztwory w warstwie 1 cm przy długości fali 444 nm, powtarzając pomiar trzy razy i wyciągając średnią arytmetyczną (przyjąć absorpcję właściwą równą 323).

• Wyniki pomiarów przedstawiłem w tabeli 1.1

4. Dane pomiarowe:

Absorpcja roztworu w warstwie 1 cm:

Długość fali	Absorpcja roztworu
444	0,415
444	0,413
444	0,414

Tabela 1.1

1. Opracowanie wyników:

• Na podstawie wyników z tabeli 1.1 i obliczyłem zawartość ryboflawiny:

• Średnia wartość absorpcji: $\frac{0,143 + 0,414 + 0,415}{3} = 0,414$

• Stężenie substancji:

$$c = \frac{A}{a*l}\ \ \ \ \ \ \ \rightarrow \ \ \frac{0,414}{323*1} = 0,00128\frac{g}{100ml}$$

• Masa ryboflawiny w 200 ml badanej próbki:

$$m = 0,00128\frac{g}{100ml}*2\ dm^{3} = 2,56\ mg$$

• Obliczam rzeczywistą zawartość ryboflawiny w tabletce:

2, 56 mg − 14, 0 mg ; $x = \frac{16,13*2,56}{14} = 2,95\ mg$

         x    −  16, 13 mg

• Obliczam zawartość procentową ryboflawiny w całej tabletce:

3 mg − 100% ; $x = \frac{2,95*100}{3} = 98,33\%$

2, 95 mg − x

1. Wnioski:

Zawartość ryboflawiny w badanej tabletce wynosi 98,33% co odpowiada wymaganiom Farmakopei Polskiej [zawartość ryboflawiny 98% - 102%].

1. Wykonanie ćwiczenia:

1. Miareczkowanie wstępne.

1. Do naczyńka odmierzono 10 cm³ roztworu otrzymanego do analizy i dodano 25 cm³ roztworu azotanu baru.

2. Przygotowano elektrody: elektrodę srebrną oczyszczono mechanicznie (papierem ściernym), elektrodę kalomelową opłukano wodą destylowaną i osuszono bibułą.

3. Obydwie elektrody umieszczono w naczyniu z roztworem przygotowanym do miareczkowania (punkt 1) tak, aby końcówki elektrod były zanurzone w roztworze, a mieszadło magnetyczne obracało się swobodnie. Objętość roztworu zwiększono dodając wody destylowanej.

4. Wyprowadzenie elektrod połączono z zaciskami woltomierza (pehametru) zgodnie z instrukcją uruchomiono mieszadło magnetyczne i wykonano pierwszy pomiar SEM zestawionego ogniwa.

5. Przygotowany roztwór miareczkowano mianowanym roztworem AgNO₃ dozując roztwór po 1 cm³. Po dodaniu każdej porcji titranta odczekano do ustalenia się SEM ogniwa i zmierzono jej wartość.

6. Wyniki pomiarów zapisano jako: objętość AgNO₃ [cm³] od potencjału elektrody srebrnej [mV].

7. Na podstawie danych miareczkowania wstępnego (punkt 6) ustalono przedziały dodawania titranta tak, aby na łukach krzywej miareczkowania i w pobliżu punktów równoważnikowych (PR) uzyskać duże zagęszczenie punktów pomiarowych.

1. Miareczkowanie dokładne.

   1. Przygotowano roztwór w sposób opisany w punkcie 3.a.1, zwracając uwagę na dokładne odmierzenie roztworu badanego.

   2. Przeprowadzono miareczkowanie dozując roztwór miareczkujący w sposób ustalony w punkcie 3.a.7.

   3. Wyniki pomiarów zestawiono w tabeli 1

Tabela 1.

V, ml	SEM, mV
0,0	-303,2
1,0	-307,5
2,0	-309,1
3,0	-309,8
4,0	-309,7
5,0	-321,4
6,0	-324,9
7,0	-319,4
8,0	-318,6
9,0	-309,7
10,0	-299,6
10,5	-302,5
11,0	-297,4
11,5	-290,6
12,0	-280,8
12,5	-267,4
13,0	-221,3
13,5	-58,6
14,0	-9,7
14,5	5,6
15,0	9,3
15,5	12,9
16,0	14,7
16,5	20,1
17,0	21,5
17,5	25,6
18,0	33,4
18,5	40,7
19,0	55,6
19,5	68,5
20,0	103,4
20,5	121,8
21,0	182,3
21,5	195,7
22,0	206,1
22,5	215,6
23,0	223,9
24,0	230,2
25,0	235,8

4. Opracowanie wyników:

1. Na podstawie wyników z tabeli 1 sporządzono wykres krzywej miareczkowania potencjometrycznego mieszaniny jonów J^- i Cl^- oraz odczytano z niego punkty końcowe miareczkowania.

Otrzymana krzywa charakteryzuje się dwoma skokami odpowiadającymi zmiareczkowaniu jonów J^- i Cl^-. W związku z obecnością w mieszaninie jonów jodkowych i chlorkowych pierwszy wytrąca się osad tego związku, który jest trudniej rozpuszczalny, czyli jego iloczyn rozpuszczalności K_so jest mniejszy.

Wartości iloczynów rozpuszczalności:

K_{so, AgI} = 8,5 ⋅ 10^-17

K_{so, AgCl} = 3,3 ⋅ 10^-13

Z wartości tych wynika, że jony J^- strącają się jako pierwsze, a następnie strącają się jony Cl^-.

Objętości titranta (AgNO₃) odpowiadające punktom równoważnikowym, odczytane z krzywej miareczkowania, mają następujące wartości:

PK₁ = 13,20 cm³

PK₂ = 20,25 cm³

1. Na podstawie tabeli 2 sporządzono wykres zależności ΔSEM/ΔV = f(V) (wykres I pochodnej).

Tabela 2.

V, ml	SEM, mV	Δ SEM, mV	ΔSEM/ΔV, mV/ml
0,0	-346,2
1,0	-344,4	-1,8	1,8
2,0	-342,1	-2,3	2,3
3,0	-339,3	-2,8	2,8
4,0	-337,4	-1,9	1,9
5,0	-334,1	-3,3	3,3
6,0	-329,8	-4,3	4,3
7,0	-325,6	-4,2	4,2
8,0	-320,6	-5,0	5,0
9,0	-314,5	-6,1	6,1
10,0	-308,2	-6,3	6,3
10,5	-303,7	-4,5	9,0
11,0	-298,7	-5,0	10,0
11,5	-292,1	-6,6	13,2
12,0	-283,0	-9,1	18,2
12,5	-266,7	-16,3	32,6
13,0	-214,5	-52,2	104,4
13,5	-23,1	-191,4	382,8
14,0	8,3	-31,4	62,8
14,5	11,7	-3,4	6,8
15,0	16,2	-4,5	9,0
15,5	18,7	-2,5	5,0
16,0	22,6	-3,9	7,8
16,5	26,5	-3,9	7,8
17,0	30,8	-4,3	8,6
17,5	37,2	-6,4	12,8
18,0	45,2	-8,0	16,0
18,5	54,3	-9,1	18,2
19,0	69,8	-15,5	31,0
19,5	101,3	-31,5	63,0
20,0	119,4	-18,1	36,2
20,5	135,7	-16,3	32,6
21,0	168,1	-32,4	64,8
21,5	182,9	-14,8	29,6
22,0	201,8	-18,9	37,8
22,5	217,7	-15,9	31,8
23,0	223,5	-5,8	11,6
24,0	232,5	-9,0	9,0
25,0	238,8	-6,3	6,3

Ponieważ analizując wykres I pochodnej, widać znaczne rozbieżności w punktach leżących wokół maksimum, do obliczeń przyjęto punkty końcowe miareczkowania odczytane z krzywej miareczkowania potencjometrycznego mieszaniny jonów J⁻ i Cl⁻.

5. Obliczenia.

a) obliczono masę jonów J⁻:

W = 10

= 1,7723 g

b) obliczono masę jonów Cl⁻:

W = 10

= 0,2757 g

Wniosek: Próbka zawierała 1,7723 g J⁻ i 0,2757 g Cl⁻.