Wirowanie w gradiencie gęstości-jedna z metod separacji materiału biologicznego(kom.immunokompetentnych).W immunologii metody

rozdzielania komórek nazywamy technikami immunologii komórko

wej i stosujemy je w celu uzyskania interesując.nas populacji kom.

Kom.immunokompetentne-to wszystkie kom.zdolne do wywołania

odpowiedzi immunologicznej.Kom.immunokompetentn.krwi:*kom.

mononuklearne(limfocyty B,T,monocyty),*polimorfonuklearne(eozy

nofile,bazofile,neutrofile).Kom.immunokomp.innych tkanek:*Mak

rofagi w odmiennych postaciach występują w różnych narządach np.

kom.Kupffera w wątrobie,kom.Lamperhansa w skórze,makrofagi

ośrod.ukł.nerw.(m.oponowe),osteoklasty(m.szpiku kostnego),makro

fagi płucne.Metody rozdziału kom.wykorzystują:różnice gęstości,

powinowactwo przeciwciał do antygenów,różnice w wielkości kom.,

różnice w rozproszeniu światła, różnice w emitowaniu fluorescencji

przez kom.znakowane.Interesujące nas kom. możemy otrzymać z:

krwi,limfy,płynów wysiękowych,szpiku kostnego,narządów limfaty

cznych(grasicy,węzłów chłonnych,śledziony,torebki Fabrycjusza,kę

pek Peyera),guzków nowotworowych,płynów jam ustrojowych,płynu

mózgowo-rdzeniowego,popłuczyn pęcherzykowo-oskrzelikowych.

Zastosowanie kom.:w diagnostyce chorób nowotworowych,analizie

cyklu kom.,cytogenetyce,genetyce molekular.,biologii kom.,mikrobio

logii,immunologii,analizie i sortowaniu gamet itp. Możemy również

uzyskiwać, po wcześniejszym wyizolowaniu interesujących nas kom.

z populacji heterogennych, ich produkty lub mediatory odpowiedzi

immunologicznej.Wirowanie w gradiencie gęstości:*technika wiro

wania jest podstaw.metodą separacji,*szybkość sedymentacji cząstek

(kom.)zależy od ich masy właściwej,wielkości i kształtu, *roztwór

generujący gradient gęstości powinien cechować się niską lepkością,

być izoosmotyczny z krwią danego gatunku, nie może osłabiać żywo

tności kom.,czy przenikać do ich wnętrza,powinien być łatwy do opł

ukania, *stężenie tego roztworu stopniowo wzrasta w kierunku dział

ania siły ośrodkowej, *podczas wirowania kom. sedymentują do mo

mentu osiągnięcia strefy w której masa właściwa roztworu jest równa

ich masie właściwej i tam pozostają, *wyróżniamy wirowanie w grad

iencie jednostopniowym i dwustopniowym(pozwala wyizolować

oprócz kom.nuklearnych także kom.polinuklearne).