SESJA 2010 - pytania z terminu -1
Transgeneza zwierząt: (egzamin ustny)
Co to są zwierzęta gnotobiotyczne?
Podaj różnicę miedzy szczepem koizogenicznym i kongenicznym.
Mozaika a chimera - różnica
Jaki rodzaj embrionu jest 0,5 dnia po zapłodnieniu (u myszy), skąd i jak się go izoluje i do jakiej metody można wykorzystać?
Zalety i wady wykorzystywania ES.
Co to są fenokopie?
Jak zwiększyć wydajność integracji i transkrypcji lentiwektorów?
Podaj przykład silnego promotora wykorzystywanego w transgenezie zwierząt.
Wspólne problemy wykorzystywania wektorów wirusowych i wektorów plazmidowych do niehomologicznej rekombinacji.
Opisz 'gene trap'.
Opisz zjawisko interferencji RNA. Mechanizm powstawania miRNA. Wspólne cechy wszystkich typów RNA do interferencji. Z jakimi kompleksami komórkowymi oddziałują? Co się dzieje z iRNA po związaniu do kompleksu? Dlaczego nie dochodzi do translacji (2 mechanizmy działania)?
Plusy i minusy nuclear transfer.
Metabolizm żelaza:
EGZAMIN PISEMNY
Scharakteryzuj i wymień reaktywne formy tlenu. Podaj mechanizm powstawania poszczególnych ROSów.
Narysuj schemat łańcucha oddechowego i zaznacz strzałkami przepływ elektronów.
Co to są siderofory i jakie mają zastosowanie w medycynie?
Jaka jest funkcja cytochromu P450 w komórce?
Narysyj schemat systemu TonB-ExbB-ExbD. Napisz jaka jest jego funkcja i opisz mechanizm działania.
Jaka jest rola DMT-1?
Funkcja i mechanizm działania czynników transkrypcyjnych Aft1p i Aft2p.
Regulacja przez białko Fur.
Typy hemochromatozy i poszczególne mechanizmy dysfunkcji.
Synteza hemu. Które etapy (jakie reakcje) mają miejsce w mitochondrium, a które w cytozolu?
EGZAMIN USTNY
Gdzie pierwotnie powstają same centra żelazo siarkowe ( + nazwa przykładowego białka)? Skąd dostarczana jest siarka, a skąd żelazo i jakie enzymy je dostarczają?
Mechanizm metalacji protoporfiryny IX
Regulacja za pomocą IRPs.
Pobieranie żelaza z pokarmu.
Pobieranie żelaza przez komórki krwiotwórcze ze szczególnym uwzględnieniem zmian pH i ich roli.
Wymień transportery żelaza do mitochondrium.
Jak będziecie mieć otwarte to piszcie wszystko co wiecie, bo u mnie się czepiał np. na pyt.4 z pisemnego, że nie napisałem gdzie jakie cyt P450 są zlokalizowane (przez co miałem połowę pkt za zadanie).
Albo na ustnym dopytywał się przy 2. o dokładną lokalizację ferrochelatazy, nie tylko że mitochondrium tylko dokładnie gdzie i czy zakotwiczona w błonie czy nie. Przy 4. stopnie utlenienia żelaza i ich zmiana w trakcie transportu, nazwy enzymów i moje ulubione pytanie: co się dzieje z elektronem zabranym z Fe2+ przez hefajstynę.
Współczesne metody biologii molekularnej:
Metoda polegająca na (chamski opis cytometrii przepływowej) to:
cytometria przepływowa
spektrometria mas
NMR
Czym zajmuje sie proteomika?
wyznaczanie masy i struktury białek
badanie ogółu białek w komórce
konstrukcja nowych peptydów (analogów, leków)
wszystko powyższe
Elektroforeza różnicująca 2D-DIGE polega na:
wykorzystaniu różnych znaczników fluorescencyjnych
zawężeniu pH
powtórna elektoforeza wyciętej plamki ale w innych warunkach
Do zbadania sekwencji białka za pomocą spektrometru mas wykorzystuje się:
trawienie trypsyną
MS/MS
fragmentację
wszystkie powyższe
(chamski opis MALDI) to:
MALDI
pułapka jonowa
TOF
Jedyna otwarte pytanie:
Były dwa wykresy ze spektometru: jeden z jednym pikiem, jeden z wieloma (ten przykład z liczeniem masy peptydu) i było trzeba podpisać jaki jonizator był użyty (odpowiedź: odpowiednio MALDI i Elektrosprej)
Biokryształy różnią się od zwykłych kryształów:
Warunek konieczny do rozpoczęcia krystalografii:
uzyskanie roztworu przesyconego
wykorzystanie zarodka z podobnego białka + inne absurdalne odp.
Najpopularniejszy sposób krystalizacji polegający na powolnym dyfundowaniu rozpuszczalnika to:
metoda dializacyjna
dyfuzja przez fazę gazową
krystalizacja w żelach
Do krystalizacji białek błonowych stosuje się:
białek błonowych nie krystalizuje się
detergentu
etanolu
Do uzyskania kryształów 2D potrzeba (zaznacz odp fałszywą)
duże stężenia białka
Glutardehyd to łącznik typu:
zero-lenght (bezpośredni)
homobifunkcjonalny
heterobifunkcjonalny
Sieciowanie białek polega na: (nawet debil by zaznaczył dobrą odpowiedź)
Obrazek z wykładu "Analiza oddziaływań między białkami" - po elektroforezie 2D jak białe kropki są ustawione po przekątnej, a 2 czarne w jednym pionie i pyt.
Te białe kropki to:
białka, które nie uległy sieciowaniu
Spin jądrowy polega na:
nieparzystej liczbie protonów i neutronów
nieparzystej l. elektronów
parzystej
Efekt overhausera - przez przestrzeń czy przez wiązania?
Był obrazek Fig4.46 z wykładu o NMR i pytanie czy to homojądrowe czy heterojądrowe widmo?
Wiązanie przeciwciało-antygen, potem przeciwciało-immunoabsorbent to metoda:
immunoprecypitacji
far-western
spektrometrii mas itp.
FACS (sorter fluorescencyjny) polega na
wykorzystaniu przeciwciał ze znacznikiem i wykrywania fluorescencji
nadawaniu przy okazji ładunku komórkom
a i b poprawne
a i c niepoprawne
Pólprzewodnikowe rozp w wodzie nanokryształy prostych zw nieorg o wł fluoroforów to:
kropki kwantowe
FRET: Były podane 2 związki A i B oraz ich widma wzbudzenia i emisji.
A donor, B akceptor
B donor, A akceptor
nie dojdzie do transferu energii
dojdzie do transferu, ale emisja akceptora bedzie nie do odróżnienia od emisji donora
Do czego służą CAMeleons?
Clomeleon:
że jeden wrażliwy drugi nie na Cl-
Było 36 pytań, ale tylko te pamiętam.
Wirusologia molekularna: (egzamin ustny)
Przed chwilą przyszedł do mnie pan z jakiejś firmy i się mnie pyta czy istnieje jakiś jeden test diagnostyczny, który pozwala stwierdzić, czy dana infekcja jest infekcją bakteryjną czy wirusową - tylko ogólnie czy wirus czy bakteria zakaziła pacjenta, nie jaki/jaka. Co by Pan mu odpowiedział?
Jakie są cechy wirusów, które odróżniają je od innych organizmów?
W jaki sposób można wykrywać konkretne wirusy?
Krótka charakterystyka HCV.
a) Jest Pan w laboratorium. Przychodzi do pana osoba i prosi, żeby Pan sprawdził czy jest zarażona wirusem HCV. Co Pan by zrobił po kolei?
b) Jakby się okazało, że tak, to jak Pan by sprawdził, czy ten wirus występuje w dużych ilościach, czy raczej jest niereplikujący się?
Proszę wymienić, jakie strategie można przyjąć przy konstrukcji leków przeciwwirusowych? (w jakie elementy cyklu życia wirusa można celować / a w jakie celuje się najczęściej?)
Proszę podać parę przykładów leków przeciwwirusowych dostępnych na rynku oraz opisać ich mechanizm działania.
2 strategie leków przeciw HIV.
Proszę opisać pokswirusy i podać przykłady chorób wywoływanych przez wirusy z tej rodziny.
Do czego może być wykorzystywany wirus vaccinia? (2 zastosowania - jedno już passé i drugie obecnie).
No to jak już Pan wspomniał, że jako wektor to:
jakiej wielkości inserty można wprowadzić do wektora vaccinia?
Dlaczego małe?
Jaka jest zasadnicza zaleta wektora opartego o pokswirusy?
Jakie są różnice między lentiwektorami a wektorami opartymi o pokswirusy?
Do czego może być stosowany wektor oparty o pokswirusy? nadprodukcja białek / uzyskanie stabilnych linii transgenicznych / produkcja białek wysokiej jakości
Jaka szczepionka jest produkowana za pomocą wektora vaccinia, obecnie, na dużą skalę?
To by było wszystko, co utkwiło mi w pamięci. Mam nadzieje, że Wam się to przyda.
Mam do Was przy okazji małą prośbę - spiszcie dla mnie pytania z egzaminu z diagnostyki.
Życzę powodzenia w zaliczaniu i do zobaczenia w październiku!!