|
Stężenie poczt |
Stężenie konc |
Na reakcje |
Starter R |
50pmol/μl |
50pmol |
|
dNTP |
5mM |
7,5μmol/μl |
|
Polimeraza |
5U/μl |
3U |
|
|
|
|
Całk. Obj=25μl |
Starter R
Należy użyć 50 pmol do reakcji, więc:
50 pmol -------- 1μl (to ze stężenia początkowego)
50 pmol -------- x μl (mamy użyć 50 pmol do reakcji i wyliczamy ile mamy wlać roztworu
startera R)
x = 1 μl (to jest odpowiedź- wpisujemy do tabeli )
oczywiście w nagłówku drugiej kolumny nie powinno być napisane stężenie końcowe, bo w przypadku startera R nie jest podane stężenie końcowe, tylko końcowa ilość moli użyta w reakcji (jest to ilość moli na całą reakcję, czyli na 25 μl).
50 pmol nie można traktować jako stężenie molowe (ilość moli na 1 litr), bo wtedy powinno być napisane 50 pM
dNTP
7,5* 10-6 mol -------- 1 μl
X mol -------- 25 μl (obliczamy ile mamy moli w naszej reakcji)
X = 1,875 * 10-4 mol
5* 10-3 mol -------1 l
1,875 * 10-4 mol ------- x l (obliczamy, ile wlać roztworu dNTP do reakcji)
X = 0,0375 l = 37500 μl (hehe, czyli 1500 razy więcej niż wynosi cała objętość roztworu-
- BEZ KOMENTARZA!!!)
Polimeraza
5 U ------- 1 μl
3 U ------- x μl
X = 0,6 μl (odpowiedź )