Woda, gleba i powietrze jako środowiska bytowania drobnoustrojów.

Część praktyczna

1. Oznaczenie bakterii grupy coli w wodzie metodą filtrów membranowych.

(Próbkę wody przesączyć przez filtr membranowy o średnicy por 0,2 μm. Następnie filtr z zatrzymanymi na nim bakteriami umieścić na podłożu Endo (podłoże namnażająco-wybiórcze dla bakterii grupy coli) i inkubować 24 do 48 godz. w temp. 37ºC. Po inkubacji policzyć kolonie typu coli znajdujące się na filtrze membranowym i obliczyć wskaźnik coli, czyli liczbę bakterii grupy coli zawartą w 100 cm³ badanej próby wody, wg wzoru:

100 cm³ x A

Vcm³

gdzie:

X- wskaźnik coli, A - liczba kolonii typu coli na filtrze membranowym; V-objętość sączonej wody).

2. Poszukiwanie bakterii i grzybów występujących w glebie.

(10 g gleby przenieść do kolby zawierającej 100 ml soli fizjologicznej i szklane perełki, wytrząsać 10 min. Tak przygotowany wyciąg glebowy rozcieńczyć 10¹, 10², 10³, 10⁴ i wysiać po 0,1 ml z każdego rozcieńczenia (posiew mazany) na podłoże uniwersalne i podłoże ZT (dla grzybów). Posiewy inkubować odpowiednio 24
i 48 godz. w temp. 37ºC i 28ºC. Policzyć kolonie, które wyrosły na podłożach po inkubacji i obliczyć liczbę drobnoustrojów w 1g badanej gleby).

0,5 ml

0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

4,5 ml 0,85% NaCl

roztwór glebowy 10^-1 10^-2 10^-3 10^-4

ZT U ZT U ZT U

Liczba drobn./grzybów w 1g gleby = liczba kolonii x rozcieńczenie x 100*

100* - na płytki wysiewano 0,1 ml roztworu glebowego; 1g gleby zawieszono w 10 ml 0,85% NaCl.

3. Analiza mikrobiologiczna powietrza metodą sedymentacyjną Kocha

(Podłoża uniwersalne eksponować w powietrzu przez 5, 10, 15 i 20 min., a następnie inkubować 24 godz. w temp. 37ºC. Policzyć kolonie, które wyrosły na eksponowanych podłożach uniwersalnych i ze wzoru wyznaczyć liczbę drobnoustrojów w 10 l powietrza oraz w 1 m³, określić stopień czystości badanego powietrza

A x 100 cm²

P x 1/2/3/4

gdzie:

X - liczba drobnoustrojów w 10 l powietrza; A - liczba kolonii na płytce;
P - powierzchnia płytki [cm ²]

współczynnik: 1-5min, 2-10 min, 3-15 min, 4-20 min).

stopnie czystości mikrobiologicznej powietrza:

Powietrze b. czyste - od 70 - 350 k/m³

Powietrze czyste - 350 - 1500 k/m³

Powietrze zanieczyszczone - 1500 - 10000 k/m³

Powietrze b. zanieczyszczone > 10000 k/m³

X =

X =

---