tuż przed ogniskiem obiektywu. W ten sposób otrzymujemy znacznie powiększony, rzeczywisty obraz, który obserwujemy za pomocą okularu. Okular pełni w tym układzie rolę lupy. Jeżeli przez f1-oznaczamy ogniskową obiektywu, przez f 2- ogniskową okularu, a przez l odległość pomiędzy obiektywem a okularem, to powiększenie mikroskopu z pewnym przybliżeniem dane jest wzorem p = gdzie d - odległość dobrego widzenia ( 250 mm ). Maksymalne powiększenie, jakie można uzyskać za pomocą mikroskopu optycznego jest ograniczone efektami dyfrakcji światła na bardzo małych elementach będących obiektem obserwacji. Nie przekracza 1500 razy.
Oprócz powiększenia innym ważnym parametrem określającym własności układu optycznego jest zdolność rozdzielcza, czyli najmniejsza odległość między dwoma punktami znajdującymi się w płaszczyźnie przedmiotu dająca się rozróżnić w uzyskanym obrazie. Zależy ona od dwóch czynników : długości fali światła użytego do obserwacji i apertury numerycznej mikroskopu zależnej od współczynnika załamania ośrodka, w którym znajduje się obserwowany obiekt. Zdolność rozdzielcza mikroskopu jest to wielkość