Wywoływanie i synchronizacja rui u bydła 13.10.2010
Pomaga utrzymać płodność na dobrym poziomie
Jest realizowana poprzez zastosowanie hormonów
Farmakologiczna kontrola cyklu rujowego ma miejsce najczęściej w następujących przypadkach:
- Redukcja czasu i kosztów związanych z wykrywaniem rui
- Środek zaradczy przy tzw. cichej rui
- Indukcja rui u krów mlecznych, u których nie zaobserwowano oestrus przez 60 dni po porodzie
- Indukcja rui i aktywności rozrodczej u krów mięsnych z laktacyjnym anoestrus
- Synchronizacja cyklu u dawczyń i biorczyń zarodków
- Usprawnienie sztucznej inseminacji w niekorzystnych warunkach
Terapia hormonalna
Robi się z niej często panaceum, zapominając, że bez poprawy warunków żywienia i utrzymania podawanie hormonów nie przyniesie zadawalających rezultatów
Terapia hormonalna
• Substytucja - uzupełnienie podejrzewanych niedoborów
• Stymulacja - zastymulowanie np. jajników
• Inhibicja - np. sztuczne PG żeby zniszczyć c. ż.
• Działanie farmakologiczne - np. wywoływanie porodu przez kortykosterydy
Uwaga III!
• Każda ingerencja w procesy rozrodcze powinna bazować na dobrej znajomości biologii rozrodu
Cykl u bydła
• Proestrus i oestrus tworzą fazę pęcherzykową (folikularną) cyklu a monoestrus oraz dioestrus fazę
lutealną cyklu
Hormony używane u bydła w celu indukcji i synchronizacji rui
Zastosowanie maj a tutaj:
- PgF2 alfa lub jej syntetyczne analogi
- Progesteron lub jego syntetyczne pochodne
- Analogi GnRH
Hormony jajnikowe
Chodzi tu oczywiście o estrogeny i progesteron
Z powyższych hormonów większe znaczenie praktyczne mają progesteron oraz jego syntetyczne analogi
Same estrogeny nie są już dzisiaj używane - zwłaszcza, że od X 2006 obowiązuje w UE zakaz stosowania estradiolu u zwierząt gospodarskich
Zasada działania
Egzogenne źródło progesteronu działa jak „sztuczne ciałko żółte"
Tak więc poprzez ujemne sprzężenie zwrotne wpływa na oś podwzgórze-przysadka wywołując supresję cyklicznej aktywności
Po usunięciu tego źródła - na zasadzie efektu zbiórki -następuje wyrzut gonadotropin
Uwaga !!!
Kilkadziesiąt lat temu pochodne progesteronu były zazwyczaj stosowane per os wraz z karmą przez 1 - 3 tygodnie
Obecnie jednak progesteron oraz jego syntetyczne analogi stosowane są w formie spiral (wkładek) dopochwowych lub implantów!!
Syntetyczne pochodne progesteronu - progestageny
Przykładem był preparat Crestar służący do indukcji i synchronizacji rui
Składał on się z podskórnego implantu zawierającego 3 mg progestagenu o nazwie norgestomet oraz 2 ml płynu iniekcyjnego zawierającego 3 mg norgestometu i 5 mg walerianu estradiolu
CIDR
- jest to wkładka powleczona elastomerem zawierającym 1,9g lub 1,38 progesteronu
- CIDR nie zawiera estradiolu - trzeba zawsze użyć PGF2alfa, zazwyczaj w dniu wyjęcia wkładki lub w przeddzień, żeby zniszczyć c.ż. które może tam być
- wkładki aplikujemy w miarę czysto umyć, dezynfekcja
- CIDR jest wyjmowany z pochwy po upływie 7-12dni
- ruja powinna wystąpić 48-96h po wyjęciu wkładki, przy czymsamice są inseminowane wg objawów lub po 56h
Niektóre preparaty prostaglandynowe - dawkowania
• Dinolytic - dinoprost 25 mg/ zwierzę - odpowiednik naturalnej PG, najbardziej kurczy macicę i może być używany w lecz zap
Reszta syntetyczne analogi
• Prosolvin - luprosirtol 15 lub 7,5 mg/zwierzę jeszcze najbliższy
• Oestrophan - cloprostenol - 0,5 mg/zwierzę - najczęściej używany
• Bioestrovet - cloprostenol - 0,5 mg/zwierzę
Cloprostenol - najczęściej używany
Najpopularniejszym zastosowaniem Pg F2 alfa jest indukcja i synchronizacja rui
1. Bo
2. Ov
3. Su
4. Eq
UWAGA!!!!
• Podawanie preparatów prostaglandynowych nie ma sensu przy nieczynnych jajnikach, kiedy przez dłuższy czas brak jest ciałka żółtego
Termin wystąpienia rui po podaniu PG F2alfa
Zmienność w pojawianiu się rui po podaniu PG F2alfa - falowość
Przykłady programów przy użyciu Pg F2 alfa
Sposób 1a
Dzień 0 Infekcja PgF 2 alfa - „na ślepo” bez uprzedniego badania i obserwacji
Wykrycie rui
Unasienniania wg objawów rujowych
Sposób 1b
Stwierdzenie c.ż. dojrzałego
Dzień 0 iniekcja PgF 2 alfa
Wykrycie rui
Unasiennienie wg objawów rujowych
Sposób 1c
Zaobserwowanie rui lub dane z zapisu
Iniekcja PgF 2 alfa po upływie min. 5 dni
Wykrycie (nowej) rui
Unasiennianie wg objawów rujowych
Sposób 2a
Dzień 0 - 1-sza iniekcja PgF 2 alfa
Dzień 11 -14 - 2-ga iniekcja PgF 2 alfa
Unasiennianie wg objawów rujowych
Wariant 2b
Dzień 0 - 1-sza iniekcja PgF2 alfa
Dzień 11-14- 2-ga iniekcja PgF2 alfa
Unasiennianie bez obserwacji objawów rujowych w ściśle określonym terminie, tj. w 72 i 96 godz lub w 80 jeśli tylko raz
Wariant 2c
Dzień 0 - 1sza iniekcja PGF2alfa
Wychwycenie rui w ciągu 5 dni i unasiennianie wg objawów rujowych
Dzień 11-14 - 2ga iniekcja PGF2alfa u tych krów, które nie były unasienniane
Unasiennianie wg objawów rujowych lub w określonym terminie tj. po upływie 72-96h po 2gim podaniu
Istota 2-krotnego podawania prostaglandyny F2 alfa
Sposób 3 - target breeding
1st 25mg PGF - 14dni - 2nd 25mg PGF - 14dni - 3rd 25mg PGF - 72-80h - AI
Pocz ok 30 dnia po porodzie
Mechaniczne wyłuszczanie ciałka żółtego
Uwaga !!!!!!!!!
Obecnie wielką, popularność zyskuje synchronizacja rui i owulacji przy pomocy PgF 2 alfa i GnRH znana pod nazwą OVSYNCH
Uważa się, że metoda ta będzie cały czas udoskonalana i przyniesie dużo korzyści, choć na razie wyniki nie są jednoznaczne
Analogi GnRH
Są to dekapeptydy (podobnie jak naturalny GnRH) lub nonanapeptydy
Nazwy niektórych preparatów: -Receptal -Biorelina -Fertagyl -Depherelin -Ovarelin
0 karencji na mleko
Wspólna użycie Pg F2 alfa oraz GnRH w celu synchronizacji rui i owulacji - OVSYNCH
- istotą tej metody jest podanie GnRH w dowolnej fazie cyklu w celu wywołania jajeczkowania pęcherzyka dominującego i pojawienie się nowego, aktywnego c.ż.
- siedem dni po GnRH podawana jest PGF2alfa a po następnych 48h następuje kolejna iniekcja GnRH
- Inseminacja ma miejsce 16-24h po 2gim podaniu GnRH
Po podaniu PgF2alfa następuje regresja:
- wszystkich c.ż. dodatkowych i zlutenizowanych pęcherzyków powstałych po pierwszym podaniu GnRH
- Jakiegokolwiek „normalnego” c.ż. powstałego w wyniku spontanicznej owulacji
- W momencie wykonywania drugiej iniekcji GnRH powinien byt (już) obecny nowy pęcherzyk dominujący
- inne ujęcie graficzne faktu, że w tym momencie wykonywania drugiej iniekcji GnRH powinien być (już) obecny nowy pęcherzyk dominujący
Celami pierwotnego programu Ovsynch była:
• hormonalna kontrola wzrostu nowej fali pęcherzyków
• kontrola długości życia spontanicznego i indukowanego c.ż.
• kontrola czasu owulacji pęcherzyka dominującego
Ograniczenia OVSYNCH
Głównym ograniczeniem OVSYNCH jest duża rozpiętość wyników synchronizacji, w zakresie:
- zaniku c.ż.
- indukcji owulacji w odpowiedzi na drugie podanie GnRH
U około10-30% krów cykl może nie zostać zsynchronizowany - jest więc prawdopodobne, że niezsynchronizowane krowy mogą być inseminowane w nieodpowiednim czasie w stosunku do momentu owulacji, przez co zmniejsza się ich szansa na zacielenie
OVSYNCH - niepowodzenia w synchronizacji
Gdy wdraża się OVSYNCH w różnych stadiach cyklu płciowego to głównymi przyczynami niepowodzeń w synchronizacji są:
- brak odpowiedzi jajnikowej na pierwsze podanie GnRH
- atezja pęcherzyka dominującego przed podaniem PGF2alfa
- spontaniczna luteoliza miedzy podaniem pierwszej dawki GnRH a PGF2a
OVSYNCH u jałówek
U Jałówek poddanych Ovsynch synchronizacja jest słaba (50% - 60%)
Jest to główny powód, dlaczego mają one znacznie niższą zapładnialność niż te inseminowane podczas rui spontanicznej, wykrywanej na podstawie objawów
Istnieją różne modyfikacje programu OVSYNCH
Co-Synch
Select-Synch
Pre-Synch
Pre-Synch
PGF2alfa - 14 dni - PGF2alfa - 12 dni - GnRH - 7 dni - PGF2alfa - 2 dni - GnRH - 1 dzień - AI
Inne modyfikacje programu OVSYNCH to np.:
Zastąpienie drugiej iniekcji GnRH preparatem hCG
Przesunięcie terminu drugiego podania GnRH (skrócenie lub wydłużenie odstępu)
Łączenie OVSYCHU z CIDR-em
Embriotransfer, czyli przenoszenie zarodków u bydła
PRZENOSZENIE ZARODKÓW BYDŁA - informacje ogólne
- Dzięki tej biotechnice, można od cennej genetycznie krowy, np. matki buhajów, uzyskać więcej niż jedno cielę w ciągu roku
- Zabieg polega na poddaniu krowy (dawczyni) efektowi superowulacji, czyli poliowulacji gdzie dojrzewa więcej niż jedna komórka jajowa, następnie wykonywana jest inseminacja i wypłukanie 7dniowych zarodków
- Uzyskane w ten sposób zarodki przenosi się do krów lub jałówek (biorczyń) lub poddaje zamrożeniu, gdzie w takiej formie mogą zostać skierowane do handlu lub przechowywania w danym gospodarstwie
- Statystycznie z jednego płukania uzyskuje się 2,5 cielęcia
Kwestia podstawowa
Pierwszorzędną kwestią pozostaje „zmuszenie" organizmu krowy aby na jajnikach wystąpiło równocześnie kilka owulacji - a nie tylko jedna - jak to ma wyczaj miejsce u bydła
przypomnienie - hormony a pęcherzyk dominujący
• Przyszły pęcherzyk dominujący nabywa wkrótce po selekcji receptory dla LH, co pozwala mu na dalszy wzrost w środowisku niskiego stężenia FSH i rosnącego stężenia LH
• Pęcherzyk dominujący obniżając pośrednio (produkcja estradiolu) stężenie FSH ogranicza możliwości rozwoju pęcherzyków podrzędnych z tej samej grupy (fali) podczas, gdy sam wykorzystuje do dalszego wzrostu zarówno niskie stężenia FSH jak i rosnące LH
Jak wywołać poliowulację?
Trzeba zastosować hormony które pomogą całej grupie pęcherzyków podrzędnych z danej fali rosnąć tak samo jak „uprzywilejowany” pęcherzyk dominujący
Czyli trzeba podawać krowie egzogenny FSH lub hormon, który „naśladuje” swym działaniem FSH - chodzi tu o pozaprzysadkową gonadotropinę pozyskiwaną z surowicy źrebnych klaczy
W sprawie stosowania FSH
W przypadku stosowania FSH musimy pamiętać, że podawane hormony mają krótki czas działania - i dlatego aplikacja ma miejsce 2 razy dziennie (rano i wieczorem) - co 12 godzin przez 4 kolejne dni
W sprawie stosowania eCG
W przypadku stosowania eCG (PMSG) musimy pamiętać, że podawany hormon ma długi (niestety) czas działania - i dlatego aplikacja jest tylko jednorazowa
Efekt po hormonach -poliowulacja na jajniku bydlęcym
UWAGA !!!!!
Hormonalna indukcja poliowulacji nie może się odbywać w „byle jakiej” fazie cyklu tylko w określonym (odpowiednim) terminie
Strategie przygotowania dawczyń
Technika pozyskiwania zarodków
7 dnia bo zarodek wykluwa się 9 dnia
6-8 dzień - późna morula, wczesna blastocysta
Specjalne katetery do wypłukiwania zarodków
Katetery z balonikiem, z mandarynem
Postępowanie z zarodkami po pozyskaniu
Do pipety -> słomka
Konserwacja - ciekły azot lub do biorczyń
Ocena pozyskanych zarodków
Synchronizacja dawczyń i biorczyń
Biorczynie PG kilka godzin wcześniej
jeden z rysunków A. Mleczki