20100331334

Imię i nazwisko:

1.    Wyjaśnij, dlaczego pH środowiska ma wpływ na szybkość reakcji enzymatycznej. o/z

2.    Podaj definicję stałej Michaelisa. Wyznaczono wartości K_m dla trzech substratów fosfatazy kwaśnej, które odpowiednio wynoszą: fosforan nitrofenolu (K_m = 5 mM), C) 9 fosforan seryny (K_m = 2 mM), fosforan fenoloftaleiny (Km = 0,5 mM). Na jednym wykresie Michaelisa-Menten zaznacz te wartości i uzasadnij, który z substratów jest preferowany przez fosfatazę.

3.    Pewien enzym wykazuje liczbę obrotów 500 000 s'¹. Co oznacza ta wartość ?    /

4.    Podaj definicje jednostek w których wyrażana jest aktywność enzymów. ^/f/7

m

5.    Napisz reakcje glikolizy w których jest zużywany lub syntetyzowany ATP (z uwzględnieniem nazw i wzorów strukturalnych substratów i produktów oraz nazw wszystkich enzymów katalizujących poszczególne reakcje). Przy każdym z enzymów podaj numer klasy

M

6.    Napisz równanie reakcji utleniania mleczanu. Podaj nazwy substratów i produktów reakcji. Podaj nazwę i narysuj strukturę związku, który jest podstawą do oznaczenia niniejszej aktywności enzymatycznej. Przy jakiej długości fali będziesz prowadził pomiar spektrofotometryczny ? - uzasadnij. Czy w tym wypadku będziesz oznaczał przyrost czy spadek absorbancji próby ? — uzasadnij odpowiedź.

Z.

7.    Dlaczego izoenzymy H i M dehydrogenazy mleczanowej można rozdzielać metodą elektroforezy ?

8.    Mieszanina reakcyjna do oznaczania aktywności fosfatazy zawierała: 0,25 ml 8 mM nitrofenylofosforanu; 0,25ml 50 mM buforu octanowego pH 5,5; 0,5 ml ekstraktu enzymatycznego. Po czasie inkubacji, reakcję hamowano dodając 5 ml 10 mM NaOH.

Napisz iak przygotujesz próbę zerowa.

9.    Zakładając, że RNaza jest hydrolazą, której substratem są nukleotydy pirymidynowe oraz, że enzym ten uwalnia nukleotyd z ufosforylowanym końcem 5’, napisz reakcję hydrolizy: 5’CpU3’ (narysuj ten związek oraz podaj nazwy 1 narysuj struktury ( produktów reakcji).

ZADANIA RACHUNKOWE:

1. Oblicz pH roztworów:

•    20 mM NaOH

•    0,2 M HC1