i
i
PRAKTYKA KLINICZNA
Przyżyciowo obecność wirusa można wykazać w kale. Od zwierząt padtych pobiera się do badać wycinki jelita cienkiego. Poza badaniem mikroskopowym, pozwalającym określić stopień uszkodzenia kosmków jelitowych, możemy wykorzystać inne techniki diagnostyczne, umożliwiające wykazanie obecności wirusa w pozyskanym materiale. Do wyboru mamy zestawy diagnostyczne, jak szybki test ELISA do wykonania w gabinecie lekarskim, oraz techniki bardzo czule, wymagające jednak specjalistycznego sprzętu diagnostycznego (tab. I). Przy interpretacji wyników badań, szczególne wykonywanych szybkim testem ELISA, należy wziąć pod uwagę możliwość uzyskania wyniku fałszywie ujemnego, na co wpływa m.in. czas pobrania materiału (obecność wirusa w kale), obecność krwi w kale czy też obecność przeciwciał blokujących wirus. Coraz częściej zastosowanie w rozpoznawaniu zakażeń parwowirusowych ma technika PCR. ze starterami dla regionu VP1/VP2, czy hybrydyzacja in situ. Czułość tych metod pozwala wykazać w badanym materiale już 10 cząstek wirusa. co w przeliczeniu na miano stanowi około 10-' cząstek wirusa/1 g kału. Izolacja wirusa na liniach komórkowych nie jest wykonywana w codziennej praktyce ze względu na wysokie koszty i dużą czasochłonność. Także z powodu szybkiego egu choroby nie znalazły zastosowania badania serologiczne. Test immu-rrofiuorescencji pośredniej - 1FAT (Indi-rect Fluorescent Antibody Test) oraz od-cya hamowania he maglu tynacji - HI Hemaglurinarion Inhibition) czy SNT test seroneutializacji wirusa) pozwalają wykazać obecność swoistych przeciwciał klasy fgG dopiero w 7-14 dni po zakażeniu. lednak żaden z tych testów nie pozwala określić poziomu przeciwciał sekre-cyjnych klasy IgA obecnych na powierzchni błony śluzowej jelit, które _!_fia_? ! i 1 ! ■ i ■ • ! ! • -_S_^___!_
Ryc
nikł
Ryc. 2. Biegunka w przebiegu parwowirozy. Tabela I. Diagnostyka laboratoryjna zakażeń CPV-2
Metoda diagnostyczna |
Wynik dodatni |
Przyczyny wyników fałszywie dodatnich |
Przyczyny wyników fałszywie ujemnych |
Wykrycie wirusa w kale testem ELISA |
do 3.-5. dnia choroby |
bakterie, zanieczyszczenia |
od 3.-5. dnia choroby |
Wykrycie wirusa w kale testem aglutynacji lateksowej |
do 3.-5. dnia choroby |
bakterie, zanieczyszczenia |
od 3.-5. dnia choroby |
Mikroskop elektronowy |
do 1-2 tygodni |
inne wirusy z rodź. Panmwridae |
mata ilość wirusa |
PCR |
do 1-2 tygodni |
zanieczyszczenia |
blokery polimerazy Taq |
Izolacja wirusa na hodowli komórkowej |
do 2-3 tygodni |
- |
mała ilość wirusa |
Tabela II. Zastosowanie różnych technik diagnostycznych w rozpoznawaniu zakażeń CPV-2 u psów
Materiał diagnostyczny |
Metoda diagnostyczna |
Próba dodatnia od: |
Próba ujemna od: |
Kai, wymaz z prostnky |
test ELISA |
2.-3. dzień p.i. |
5.-7. dzień p.i. |
Kai, wymaz z prostnicy |
test aglutynacja lateksowej |
2.-3. dzień p.l. |
5.-7. dzień p.i. |
Kat, wymaz z prostnicy |
mikroskop elektronowy |
3,-4. dzień p.i. |
2.-3. tydzień p.i. |
Kat. wymaz z prostnicy |
PCR |
3,-4. rhrlnń a i |
oiśjb/rizień.n,^^ |
i