CCF20110418000 (2)

Mikrobiologia farmaceutyczna - ćwiczenie II 05/06.04.11

1.    Odczyt wyników z poprzednich ćwiczeń

UWAGA: o ile w badaniu jałowości nie stwierdzimy wzrostu, to próby należy pozostawić do dalszej inkubacji

2.    Kontrola czystości mikrobiologicznej leków, dla których nie jest wymagana jałowość Przestrzegając zasad pracy jałowej należy wykonać badanie czystości mikrobiologicznej tabletek doustnych - placebo.

Jest to preparat doustny, niezawierający wody więc wg FPVIII supl.20010 5.1.4 kryteria akceptacji są następujące:

ogólna liczba drobnoustrojów tlenowych 10¹/gram ogólna liczba pleśni i drożdży 10²/gram Nieobecność w 1 gramie Escherichia coli

A.    Badanie ilościowe

10 g preparatu należy zawiesić w 100 ml soli zbuforowanego roztworu soli fizjologicznej. Wytrząsać w temperaturze ok. 30°C przez 15 min. Z kolbki pobrać próbki 1 ml (rozieńczenie 10"¹) i 0.1 ml (rozcieńczenie 10'²), a następnie przenieść do jałowych płytek (każde rozcieńczenie wysiać w 4 powtórzeniach). 2 płytki z rozcieńczeniem 10"' i 2 płytki z rozcieńczeniem 10' zalać ciepłym, ostudzonym do temperatury ok. 40°C agarowym podłożem kazeinowo-sojowych i delikatnie wymieszać (inkubacja w kierunku bakterii; 30-35°C, 3-5 dni); pozostałe 4 płytki (2 z rozcieńczeniem 10' i 2 z rozcieńczeniem 10') zalać ciepłym, ostudzonym do temperatury ok. 40°C agarowym podłożem Sabouranda i delikatnie wymieszać (inkubacja w kierunku grzybów; 20-25°C, 5-7 dni). Płytki pozostawić do zastygnięcia.

UWAGA: Płytki do inkubacji w temperaturze 20-25°C proszę zostawić podpisane nazwą grupy w wieczkach od tubusów na stole demonstracyjnym.

B.    Badanie jakościowe

- Badanie w kierunku obecności Escherichia coli

Próbkę odpowiadającą 1 g z zawiesiny w soli fizjologicznej wprowadzić do bulionu kazeinowo-soj owego

1

   Prezentacja firmy Milipore:

a)    systemu Steritest do badania jałowości w układzie zamkniętym

b)    systemu Millillex Quantum do szybkiego badania obciążenia mikrobiologicznego w preparatach farmaceutycznych