CCF20110418000

Mikrobiologia farmaceutyczna - ćwiczenie 131.03/01.04.11

Kontrola mikrobiologiczna leków, dla których wymagana jest jałowość

1.    Badanie żyzności podłoży stosowanych w badaniu jałowości

Do probówki zawierającej 10 ml podłoża tioglikolanowego (podpisanej „tio 10’') należy wprowadzić nie więcej niż 100 cfu szczepu testowego Staphylococcus ctureus, a do probówki zawierającej 10 ml bulionu kazeinowo-sojowego (podpisanej „KSB 10”) należy wprowadzić nie więcej niż 100 cfu szczepu testowego Candida albicans

2.    Test przydatności badania jałowości metodą posiewu bezpośredniego preparatu sól fizjologiczna do wstrzykiwań

Do probówki zawierającej 9 ml podłoża tioglikolanowego (podpisanej „tio 9”) należy wprowadzić aseptycznie 1 ml badanego preparatu (pipetą automatyczną), a następnie nie więcej niż 100 cfu szczepu testowego Staphylococcus aureus, a do probówki zawierającej 9 ml bulionu kazeinowo-soj owego (podpisanej „TSB 9”) należy wprowadzić aseptycznie 1 ml badanego preparatu (pipetą automatyczną), a następnie nie więcej niż 100 cfu szczepu testowego Candida albicans.

UWAGI DO PUNKTÓW 1 i 2:

Szczepy otrzymaliście Państwo w postaci hodowli w podłożu płynnym. Gęstość hodowli Staphylococcus aureus wynosi ~10⁹ cfu/ml, gęstość hodowli Candida albicans wynosi ~10⁷ cfu/ml. Szczepy testowe powinny być wprowadzane do podłoży w objętości nie większej niż 0,2 ml. W celu uzyskania zawiesiny o pożądanej ilości komórek, należy wykonać szereg 10-krotnych rozcieńczeń hodowli wyjściowej. Konieczną ilość 10-krotnych rozcieńczeń należy ustalić samodzielnie i skonsultować ze swoim asystentem.

Próby badane w podłożu tioglikolanowym inkubuje się w temperaturze 30-35°C; wstawiamy je podpisane nazwą grupy do cieplarki.

Próby badane w bulionie kazeinowo-sojowym inkubuje się w temperaturze 20-25°C; zostawiamy je podpisane nazwą grupy w statywie na stole demonstracyjnym.

3.    Badanie jałowości metodą posiewu bezpośredniego preparatu sól fizjologiczna do wstrzykiwań

Badanie należy wykonać wprowadzając aseptycznie zawartość ampułek do 1 kolbki z bulionem kazeinowo-sojowym; inkubacja 20-25°C i 1 kolbki z podłożem tioglikolanowym; inkubacja 30-35°C. UWAGA: do każdej kolbki wprowadzamy całą zawartość ampułki.

Kolbki do inkubacji w temperaturze 20-25°C zostawiamy podpisane nazwą grupy na stole demonstracyjnym.

kz> ‘bo.M f-'£ -    to £ /

d top U