histologia wyk³ad5

Reakcja histoenzymatyczna powinna:

Być reakcją szybką aby uniknąć błędów wywołanych dyfuzją produktów.

Dawać-jako produkt niekrystaliczny-drobnoziamisty strąt.

Wytworzony strÄ…t nie powinien rozpuszczać siÄ™ w pÅ‚ynie inkubacyjnym oraz wykazywać możliwie duży molowy współczynnik ekstynkcji aby zapewnić wysokie nasilone barwy. Ilość powstajÄ…cego stÄ…tu powinna być możliwie Å›ciÅ›le skorelowana z aktywnoÅ›ciÄ… badanego enzymu.

Specjalne techniki badawcże-reakcja Gomoriego;

Reakcja Gomoriego (reakcja precypitacji z kationami metali), służy do wykrywania ftydrólaz.

Reakcja polega na Wstępnym rozszczepieniu substratuś przez wykrywany w tkankach enzym

Następnie po wytrąceniu jednej ze składowych rozpuszczonego substratu jonami metali (Ca, Pb, Cu, Ba, Co)

Powstaje nierozpuszczalna sól.

Większość z tych soli jest widoczna w mikroskopie elektronowym, natomiast do celów mikroskopii świetlnej czasami należy przeprowadzić dodatkową reakcje barwną.

Fosfataza zasadowa Tkanka(eozyna)	fosfataza kwaśna + substrat (glicerolofosforan)
Bufor weronalowój	bufor octanowy
pH	pH
Ca-H* s	Pb++ t

.Hydroliza.

CaHP04-stręty niewidoczne- PbHP04

i

Co++

(sól kobaltu)

CoHP04 4---(NH2)2Sx---

1    (wielosiarczek amonu)

*

CoS    PbS

(czarne)-► barwne strąty «-- (brązowe)

W miejscach aktywności Odpowiedniego enzymu.

6