11179896�031438865349044779596 o

Pt/tUiuL niłUTul:>A Jsdłk:. < my« ivk«ci lub w c«pki rrwriiWN w celu fa/ygutowuai* dt» vwkmń 2br>£cmii in^vuimv£ u K*Łcdr/c EuKbeesa. WRłB SOOW w W*i/jmic boe r>>LiA>Umc t\v>. mitaadiM be* /{uib puomikAw lUlcsky Sudanu 10: /jttcaKae

Do jednej probówki odmierzyć 0,5 ml rozcieńczonego preparatu kwasów nukleinowych (próba pełna), do drugiej probówki 0,5 ml 0,1 M NaOH (2) (próba odczynnikowa). Następnie do obu probówek dodać po 2 ml roztworu difenyloaminy (5), dokładnie wymieszać i wstawić do wrzącej łaźni wodnej na 5 min.

4. Reakcje wykonywane na preparacie hydrolizowanym DNA.

a.    Wykrywanie tyminy.

Reakcja służąca do wykrywania tyminy, odróżniająca oba typy kwasów nukleinowych (DNA i RNA), polega ona na wytworzeniu przez tyminę z diazową pochodną kwasu sulfanilowego kompleksu o barwie czerwono-róźowej, dodatek hydroksyloaminy, w środowisku zasadowym wzmacnia barwę kompleksu.

Do dwóch probówek odmierzyć po 2,5 ml NaiCO.t (8) i po 1 ml odczynnika diazowego (9), zawartość obu probów ek dokładnie w ymieszać. Następnie do jednej z tych probówek dodać 0,5 ml zobojętnionego hydrolizatu kwasów nukleinowych (próba pełna), a do drugiej 0,5 ml zobojęmionego roztworu próby odczynnikowej, zawartość obu probówek dokładnie wymieszać. Po 5 minutach inkubacji w temperaturze pokojowej do obu probówek dodać po 1 ml 3 M NaOH (10) i 2-3 krople hydroksyloaminy (11), zawartość probówek dokładnie wymieszać i po 5 min obserwować zabarwienia roztworów' w próbie pełnej i odczynnikowej.

b.    Wykrywanie reszt fosforanowych.

Reakcja charakterystyczna dla fosforanów polega na łączeniu się molibdenianu amonu z jonem fosforanowym, w wyniku czego powstaje żółty osad fosfomolibdenianu amonu.

Do jednej probówki odmierzyć 1 ml rozcieńczonego kwaśnego hydrolizatu kwasów nukleinowych, a do drugiej 1 ml rozcieńczonego kwaśnego roztworu próby odczynnikowej. Następnie do obu probów ek dodać po 2 ml roztworu molidbenianu amonu (6), zawartość obu probówek dokładnie wymieszać.

Opracowanie wyników

W sprawozdaniu należy podać otrzymane zabarwienia po przeprowadzeniu poszczególnych reakcji oraz opisać zasady metod wykorzystywanych w tych reakcjach. Wyjaśnić celowość wykonywania prób odczynnikowych.

Pytania

1. Napisać i podać wzory zasad purynowych i pirymidynowych. Podać ich nazwy systematyczne.

7