247 1

Potrzymania mutantów opornych na antybiotyki należy przygotować szereg pożywek

■    o zmiennej zawartości antybiotyku. Powszechnie stosowana metoda Szybalskiego

■    polega na przygotowaniu tzw. płytek gradientowych, zawierających pożywki o stop-I niowo malejącym stężeniu antybiotyku (rys. Y-1.3).

pożywka agarowa

Rys. V-1.3. Selekcja mutantów opornych na antybiotyki metodą płytek gradientowych

pożywka agarowa z antybiotykiem

Częstość mutacji jest raczej niska i dla większości dotychczas badanych cech wynosi od 10~⁵ do 10~^]0. Zwiększenie udziału mutantów można uzyskać różnymi metodami, np. metodą penicylinową. Wzbogacenie populacji w mutanty auksotroficzne uzyskuje się przez działanie czynników hamujących ich wzrost i jednocześnie eliminujących [rosnące komórki niezmutowane. Do takiej selektywnej eliminacji stosowane są związki [działające jedynie na komórki rosnące i nie wpływające na komórki spoczynkowe. Po [usunięciu substancji eliminującej i dodaniu czynnika stymulującego wzrost, żywe komórki mutantów auksotroficznych mogą się namnożyć.