26022011723

B ARW NI KI SOKU KOMÓRKOWEGO - Antocyjany, zależność barwy od pH

MA TERIAŁ: liście kapusty czerwonej lub owoce ligustru (Ligustrum vulgare)

O DC Z) NNIkh 0,5% kwas octowy, 1% wodorotlenek amonu, woda destylowana

Jf ? RO\ANIE. ścinamy epidemię z liścia kapusty lub zeskrobujemy nieco miąższu spod skórki owocu ligustru i przenosimy do kropli wody destylowanej, roztworu kwasu octowego i roztworu wodorotlenku amonu umieszczonych w pewnej odległości na jednyire&zkicłku przedmiotowym, tak, aby roztwory nie wymieszały się ze sobą. Preparaty przykrywamy 3 szkiełkami nakrywkowymi (lub robimy 3 oddzielne preparaty na różnych szkiełkach)

Doświadczenie można też wykonać w następujący sposób: epidemię liścia lub miąższ owocu przenosimy do kropli roztworu kwasu na szkiełku przedmiotowym i przykrywamy szkiełkiem nakry wkowym, następnie wymieniamy za pomocą paska bibuły roztwór pod szkiełkiem nakrywkowym na wodę destylowaną a następnie w ten sam sposób na roztwór zasady. Obserwujemy zmianę zabarwienia tych samych komórek w zależności od pi I zastosowanego odczynnika.

OBSERWACJE INOTATKI: Preparaty oglądamy pod średnim powiększeniem mikroskopu (obiektyw 20x). Rysujemy przykładowe komórki i odnotowujemy wynik barwienia w zależności od pH roztworu.

RÓŻNICE W SKŁADZIE SOKU KOMÓRKOWEGO - Soki "puste" i "pełne"

Do soków pełnych należą te, które barwią się czerwienią obojętną na kolor fioletowo czerwony tj. wykazują zjawisko negatywnej mctachromazji, dzięki obecności koloidów (metachromazjajest zjawiskiem barwienia się niektórych substancji chemicznych i struktur biologicznych na kolor odmienny od barwy użytego barwnika). Soki puste zawierają roztwory właściwe i barwią się czerwienią obojętną na kolor pomarańczowoczerwony.

Barwienie czerwienią obojętną wydaje się być związane z obecnością w soku wakuolamym także flawonów, z którymi barwnik ten tworzy połączenia. Zabarwienie cynobrowe (pomarańczowo-czerwone) jest przejawem mctachromazji pozytywnej charakterystycznej dla soków pustych. Inną przyczyną mctachromazji pozytywnej soku wakuolamego po barwieniu czerwienią obojętną może być obecność w nim polifosforanów, które mogą być przez ten barwnik ujawnione w postaci czerwonego osadu. Zachodzi wówczas zazwyczaj odbarwienie soku wakuolamego.

MATERIAŁ: cebula (Allium cepa)

ODCZYNNIKI: 0,01-0,05% roztwór czerwieni obojętnej.

WYKONANIE: wykonujemy przekroje poprzeczne przez liść spichrzowy cebuli (najlepiej drugi lub trzeci od zewnątrz). Skrawki umieszczamy na szkiełku podstawowym w kropli roztworu czerwieni obojętnej. Przykrywamy szkiełkiem nakrywkowym. Czas barwienia ok. 5-10 min.

OBSERWACJE INOTATKI: Preparat obserwujemy pod średnim powiększeniem mikroskopu (obiektyw 20x). Oceniamy efekt barwienia - zróżnicowanie zabarwienia wakuol epidermy i komórek miękiszu spichrzowego. Rysujemy fragment przekroju i opisujemy skład wakuol epidermy i miękiszu (koloidy = soki pełne, lub roztwory właściwe = soki puste).