img081 2

Rye 10.2. Komórki wątrobiaka ludzkiego linii IIepG2 (mikroskop odwrócony, pow. ok. I20x,fol, T, Drewa)

I.I .Al» (L,\lracorporeal Liver Assist Device, Amphioxus Cel] Technologies) jako jedyny / zaproponowanych systemów BAL stosuje linię komórkową C3A wi|lrobiaka. LI-Al) zbudowany jest z, dwóch komór do hodowli hepatocytów. Przez komory przechodzą systemy równolegle ułożonych pustych rurek, wykonanych z włókien syntetycznych, którymi przepływa osocze pacjenta. Każda komora zawiera taką liczbę komórek, która występuje w 200 g wątroby. W celu namnożenia oraz przytwierdzenia komórek wątrobiaka do dna komory, hepatocyty linii HepG2 hoduje się przez okres trzech tygodni. W celu zapewnienia optymalnych warunków wzrostu, komory' z hepatocytami umieszcza się w inkubatorach. Krew chorego wyprowadza się z żyły szyjnej bądź udowej i przetacza sieciami włókien przez komory, w których hodowane są komórki wątrobiaka. Włókna tworzą półprzepuszczalne błony, przez które odbywa się swobodne przenikanie związków toksycznych, glukozy i tlenu z osocza pacjenta do hepatocytów, a do krwioobiegu pacjenta pochodzą metabolity i inne substancje produkowane przez hepatocyty. Błony te stanowią jednocześnie barierę uniemożliwiającą przenikanie przeciwciał o masie 70-120 kD. Krew po oczyszczeniu przez hepatocyty wraca do krwioobiegu pacjenta. Urządzenie funkcjonuje prawidłowo przez okres 48-72 h.

iw

Małopłytkowość oraz niskie ciśnienie krwi są częstymi powikłaniami ■losowania systemu ELAD. Wyniki leczenia chorych z ostrą niewydolnością Wątroby przy pomocy systemu ELAD są nieznacznie lepsze od biernych metod Itrzymywania funkcji detoksykacyjnej wątroby.

HepatAssist (Circle Biomedical) to system ze wnątrzustroj owego Wspomagania wątroby wykorzystujący świeżo wyizolowane bądź odmrożone Hepatocyty świni. Przechowywanie hepatocytów w niskich temperaturach (krioprezerwacja) zapewnia stały dostęp do komórek w miarę zapotrzebowania. Hepatocyty hoduje się na dekstranowych kulkach tzw. mikronośnikach. W celu iwiększenia przyczepności komórek, mikrośniki pokrywa się warstwą kolagenu. -Hodowla komórek na mikronośnikach zwiększa powierzchnię wzrostu komórek, 1 równoczesnym zmniejszeniem objętość hodowli. Technika ta służy do hodowli komórek na skalę masową. Urządzenie HepatAssist wykorzystuje 5-7 bilionów Komórek wątrobowych. Osocze oddziela się od elementów morfotycznych krwi pucjenta, a następnie przetacza przez kolumny węgla aktywowanego, urządzenie podgrzewające, urządzenie natleniające i przez komory z hepatocytami. Krew przepływa przez komory systemami polisulfonowych włókien. Błony budujące Włókna pozwalają na swobodną wymianę substancji między hepatocytami a środowiskiem zewnętrznym, ale nie zapewniają bariery immunologicznej. Po oczyszczeniu przez hepatocyty, osocze łączy się z elementami morfotycznymi [krwi i wraca do krwioobiegu pacjenta. Urządzenie funkcjonuje prawidłowo przez Okres 6-7h. System HepatAssist stosowano do podtrzymania funkcji wątroby u 18 pacjentów z ostrą niewydolnością wątroby. Szesnastu pacjentów utrzymano w dobrym stanie klinicznym do momentu przeszczepienia wątroby, jeden z pucjentów odzyskał funkcję wątroby i nie wymagał przeszczepu, zaś jeden zmarł )t powodu ostrego zapalenia trzustki. Zastosowanie urządzenia HepatAssist pozwoliło na zmniejszenie objawów encefalopatii oraz poprawę parametrów biochemicznych; poziom bilirubiny oraz amoniaku obniżył się o 18%. [Urządzenie HepatAssist zostało przetestowane w badaniu randomizowanym. Badaniu poddano 171 pacjentów z ostrą niewydolnością wątroby oraz z liiepodjętą czynnością wątroby po przeszczepieniu. Trzydziestodniowa przeżywalność pacjentów, w porównaniu z grupą kontrolną, wynosiła odpowiednio 71% i 62%.

LLS (Liver Support System) to systemem BAL posiadający bioreaktor do hodowli przestrzennej komórek, przez który przechodzą cztery typy kapilar. Kapilary zbudowane są z błon półprzepuszczalnych; dostarczają one hcpatocytom tlen, składniki odżywcze, oraz doprowadzają i odprowadzają