img094

Wpw = Tir²,

gdzie:

Wpw - wielkość pola widzenia (mm²), n- wartość stała 3,14, r - promień pola widzenia (mm).

Wykonanie ćwiczenia

Technika mikroskopowania i pomiar wielkości drobnoustrojów

•    Materiały: gotowe preparaty barwione (kontrolne) - E. coli, B. subtilis.

•    Aparatura: mikroskop zwykły, optyczny.

•    Sprzęt: mikrometry przedmiotowe i okularowe.

•    Wykonanie:

-    zapoznać się z budową i działaniem mikroskopu;

-    ustawić oświetlenie mikroskopu, posługując się preparatami barwionym, kontrolnym;

-    przećwiczyć technikę mikroskopowania na kontrolnych preparatach barwionych, przy zastosowaniu obiektywów suchych o różnych powię-kaszeniach (10, 40, 60 razy) i immersyjnych (100 razy);

-    obliczyć powiększenie mikroskopu przy stosowaniu różnych obiektywów i okularów;

-    obliczyć wielkość pola widzenia mikroskopu przy powiększeniach 400 i 1000 razy, posługując się wzorem;

-    zmierzyć wielkość komórki bakteryjnej przy powiększeniu 400 i 1000 razy metodą prostą (rozdz. 2.4.2) i metodą mikrometryczną (rozdz. 2.4.3).

3. TECHNIKA SPORZĄDZANIA PREPARATÓW I METODY BARWIENIA DROBNOUSTROJÓW

3.1. Zasady sporządzania preparatów mikroskopowych

Preparatem mikroskopowym nazywamy szkiełko przedmiotowe wraz z umieszczonym na nim materiałem. Warunkiem uzyskania dobrego preparatu jest użycie czystych i odtłuszczonych szkiełek przedmiotowych (podstawowych). Szkiełka odtłuszczamy przez potarcie ich powierzchni wysuszonym mydłem, które następnie ścieramy czystą szmatką. Zanim badany materiał nałoży się na szkiełko podstawowe, wskazane jest opalenie szkiełka nad płomieniem palnika. Szkiełko należy trzymać szczypcami Cornetta.

Preparat mikroskopowy można sporządzić z hodowli drobnoustrojów lub bezpośrednio z badanego produktu naturalnego, płynnego lub stałego (preparaty odciskowe). Preparaty mikrobiologiczne można oglądać pod mikrosko-

28