img201

rozcieńczeń od 10^-1 do 10~⁷. W celu wykonania rozcieńczenia 10^_1 odważyć, z zachowaniem warunków sterylności, 10 g osadu dennego i wprowadzić do kolbki z 90 cm³ sterylnego roztworu soli fizjologicznej. Zawartość kolbki homogenizować mieszadłem magnetycznym przez 10 minut. Z tak otrzymanego rozcieńczenia 10^-1 wykonać kolejne rozcieńczenia zgodnie ze schematem (rys. 11.3); z trzech ostatnich rozcieńczeń wykonać oznaczenia: ogólnej liczby bakterii na agarze odżywczym w temp. 22 i 37°C, ogólnej liczby bakterii z grupy pałeczki okrężnicy, liczby kałowych bakterii z grupy pałeczki okrężnicy, liczby paciorkowców kałowych i liczby beztlenowych bakterii redukujących siarczyny (Clostridium perfringens). W oznaczeniach tych postępować analogicznie do badań wody jeziornej (patrz pkt 1).

Odczyt wyników dotyczących stanu sanitarno-bakteriologicznego wody jeziornej i osadów dennych:

Po określonych czasach inkubacji odczytać wyniki dotyczące wysiewów wody i osadów dennych:

-    w wysiewach płytkowych dotyczących ogólnej liczby bakterii na agarze odżywczym w temp. 22 i 37°C z wysianych płytek wybrać takie rozcieńczenia, na których wyrosło od 30 do 300 kolonii. Policzyć wszystkie wyrosłe kolonie (z 3 powtórzeń danego rozcieńczenia), obliczyć średnią arytmetyczną i podać wyniki jako liczbę bakterii heterotroficznych wyrosłych na agarze odżywczym w temp. 22°C i liczbę bakterii heterotroficznych wyrosłych na agarze odżywczym w temp. 37°C w przeliczeniu na 1 cm³ wody lub 1 g świeżej masy osadu dennego;

-    w wysiewach płytkowych dotyczących liczby beztlenowych bakterii przetrwalnikujących redukujących siarczyny (Clostridium perfringens) z 3 powtórzeń danego rozcieńczenia policzyć tylko czarne kolonie, obliczyć średnią arytmetyczną i podać wynik w przeliczeniu na 1 cm³ wody lub 1 g świeżej masy osadu dennego;

-    w celu określenia miana i ogólnej liczby bakterii z grupy pałeczki okrężnicy (TC) oraz miana i liczby kałowych bakterii z grupy pałeczki okrężnicy (FC) na pożywce Eijkmana odczytać wyniki, przyjmując za wynik dodatni (+) probówkę, w której nastąpiło zmętnienie pożywki i zmiana barwy z fioletowej na żółtą, a w rurce Durhama pojawił się pęcherzyk gazu. Zmiany te świadczą o wzroście i rozwoju bakterii z rodziny Enterobacteriaceae, które w wyniku fermentacji mlekowej niewłaściwej powodują rozkład zawartej w pożywce laktozy z wydzieleniem dużej ilości kwasów (powodujących zmianę zabarwienia) i gazu (obserwowanego w rurce Durhama). Brak gazu i zakwaszenia świadczy o wyniku ujemnym (-). Na podstawie wyników określić miana TC i FC. NPL TC i NPL FC w 100 cm³ wody lub w 1 g świeżej masy osadu określić zgodnie z metodyką opisaną w rozdziale 11;