Obrazek 10

ĆWICZENIE 29

TEMAT: BEZPOŚREDNIA METODA OZNACZANIA LICZBY BAKTERII PRZY POMOCY FILTRÓW MEMBRANOWYCH

Materiały:    i

!

1. Napój chłodzący, nlegazowany po 48 h przetrzymywania otworzonej butelki ' i w temp. pokojowej    ;

i 2. Filtr membranowy o średnicy 4,5 cm i wielkości por 0,22 pm, aparat do filtracji j 3. Pompa próżniowa, kolbka próżniowa -•    4. Szkieiko przedmiotowe, szkiełko nakrywkowe

l    5.    Oranź akrydynowy, 0,1 % roztwór

l    S.    Mikroskop epifluorescencyjny

i

iWykonanle:    !

1, Jałowy filtr membranowy umieszczony w osadce zwilżyć jałową wodą destylowaną: {zapewnia to równomierne przyleganie filtra do aparatu)    j

j    2.    Przesączyć 10 ml badanego napoju    przez jałowy filtr membranowy

I    3.    Nanieść na filtr 1ml roztworu orartżu    akrydynowego,    przesączyć

j 4. Nanieść na szkiełko przedmiotowe kroplę olejku immersyjnego i 5. Umieścić na powierzchni wilgotny filtr (nie dopuścić do powstania pęcherzyków;

powietrza między filtrem a szkiełkiem)    i

I 6. Nawarstwić filtr 1 kroplą olejku immersyjnyego

j 7. Określić ogólną liczbę bakterii w 10, losowo wybranych polach widzenia! z uwzględnieniem komórek zabarwionych na zielono (żywe) i pomarańczowo, (martwe)

i 8. Określić ogólną liczbę bakterii Gtk/ml) w 1 ml badanego napoju i 9. 9. Wyniki obserwacji mikroskopowych i obliczeń (określanie wielkości pola widzenia^; - patrz: MORFOLOGIA BAKTERII) zanotować w tabeli 39    i

Rys. 20

Tabela 39

Ogólna liczba bakterii w 1ml napoju określana metodą bezpośredniego liczenia n; filtrach

Nr pola widzenia	Komórki żywe	Komórki martwe •
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
średnia liczba w 1 polu widzenia
Liczba jtk/ml

Wnioski:

Data.................... zaliczenie

mnm
		ĆWICZENIE 30 TEMAT: OZNACZANIE OGÓLNEJ LICZBY DROBNOUSTROJÓW W WODZIE METODĄ PŁYTKOWĄ

Metodę tą stosuje się także do oznaczania liczby drobnoustrojów w napojach ora żywności płynnej. Żywność stalą należy zhomogenizować z płynem do rozcieńczę: w stomacherze,

•Materiały:

1.    Próby wody pobranej z Zalewu Szczecińskiego

2.    3x3 płytki Petriego z agarem odżywczym

3.    3x3 jałowe płytki Petriego

4.    Cieplarki ustawione na 37°C i 20*0

5.    Jałowe pipety i bagietki (głaszczki)

|    6. Kolbka z jałowym agarem odżywczym ostudzonym do 45°C

i 7, Po 4 probówki z płynem do rozcieńczeń {po 9 ml)

i    ___