zdjęcie3066

-    Inkubować w temperaturze 44°C przez ok. 20 godz. (wybiórcze działanie żółci wołowej i zieleni brylantowej oraz podwyższona temperatura inkubacji sprawiają* że na pożywce Endo należy spodziewać się wzrostu jednakowych kolonii należących do Escherichia coli).

-    Z 24-godzinnej hodowli na Endo wykonać posiew wybranej kolonii na odpowiednie podłoża hodowlane. Za pomocą jałowej ezy pobrać odrobinę materiału i przesiać najpierw na podłoże Simmonsa, a potem na pozostałe podłoża (woda peptonowa z tryptofanem i dwie próby na podłożu Clarka), wszystkie próby inkubować w temp. 37°C.

-    Odczyt wyników:

-    Test na wytwarzanie indolu (I). Po 24 godz. inkubacji hodowli na wodzie peptonowej z tryptofanem dodać (wlewając po ściance probówki) kilka kropli odczynnika Ehrlicha. Nie wstrząsać Pojawienie się po chwili czerwonomalinowego zabarwienia na granicy płynów świadczy o obecności indolu, co określa się jako wynik dodatni (+■).

-    Reakcja z czerwienią metylenową (M) Do 3-, 4-dniowej hodowli na podłożu Clarka dodać 2 krople czerwieni metylenowej, wstrząsnąć Wystąpienie wyraźnie czerwonej barwy wskazuje na zakwaszenie podłoża poniżej pH 4,5 i świadczy o dodatnim wyniku tej reakcji (+). Kolor żółty określa się jako wynik ujemny (-), kolor pomarańczowy lub bardzo jasnoczerwony - jako wynik wątpliwy.

-    Reakcja Voges-Proskauera (V) stwierdza zdolność wytwarzania acetylo-metylokarbinolu (acetoiny) z glukozy Po 24 godzinach inkubacji dodać do hodowli 0,6 cm³ roztworu a-naftolu i po dokładnym wymieszaniu 0,4 cm³ roztworu wodorotlenku potasowego. Zawartość probówki wymieszać ponownie i wstawić do termostatu o temperaturze 37°C na 30-45 min Wystąpienie po tym czasie intensywnego różowego lub cMh wonego zabarwienia w górnej części płynu oznacza wynik dodatni (H t/ji ze badany szczep to Escherichia cdi typu kałowego W przypadku wyniku ujemnego (-) pożywka nie zmienia barwy lub daje lekko różowe zabarwienie (wynik charakterystyczny dla bakterii grupy coli).

Test na zdolność wykorzystywania cytrynianu jako icdyucgo źródła węgla (C), wykonany na podłożu Sinuuonsa Brak wzrostu na tej P¹'