enzymy20

114 Sekcja C - Enzymu; Sfawceja C - Enzymy

Wykres

Lineweavera-

-Burka

Równanie to opisuje krzywą hiperboliczną typu pokazanego dla danydl doświadczalnych na rysunku 2. Wyprowadzając to równanie, Michaedta i Menten zdefiniowali nową stałą, km, zwaną stałą Michaelisa (jednostki! molarność, M):

_K

K_m jest miarą stabilności kompleksu ES, stanowiąc iloraz sumy szybkości rozkładu ES i szybkości jego powstawania. Dla wielu enzymów ki jesJ znacznie większa niż k$. W tych warunkach wartość K_m staje się mia powinowactwa enzymu do substratu, ponieważ wartość ta zależy względnych wartości k\ i dla, odpowiednio, tworzenia i dysoqacji kor pleksu ES. Duża wartość K_m wskazuje na słabe wiązanie substratu przeważa nad ki), a mała wartość K_m wskazuje na silne wiązanie substraS (.ki przeważa nad ki). Wartość K_m można wyznaczyć doświadczalnie podstawie tego, że wartość ta równa się stężeniu substratu, przy któryj szybkość reakcji jest równa połowie V_max.

Ponieważ V_max jest osiągana przy nieskończenie dużym stężeniu si stratu, nie można precyzyjnie wyznaczyć wartości V_max (a więc rówr wartości K_m) z wykresu hiperbolicznego przedstawionego na rysunku Jednakże wartości V_max oraz K_m można wyznaczyć doświadczał mierząc Vq przy różnych stężeniach substratu (patrz rys. 1). Następi wykonuje się wykres kinetyki enzymu w układzie współrzędnych, ktć są odwrotnościami V i [S]), czyli wykres Lineweavera-Burka, przedstawiając l/Vo jako funkcję 1 /[S] (rys. 4b). Wykres taki pochodzi z pr2 kształcenia równania Michaelisa-Menten do postaci:

1    1 K„ 1

v„    v„„ [S]

dającej linię prostą, której przecięcie z osią y równa się llV_max, a przecięcie z osią x równa się -1 /K_m. Nachylenie linii ma wartość K_m/V_n (rys. 4b). Wykres Lineweavera-Burka stanowi również użyteczną metc określenia typu wiązania się inhibitora z enzymem (patrz temat C4). Wć tości Rm/^max można również wyznaczyć z wykresu Eadie-Hofstee’: przedstawiającego Vq jako funkcję Vo/[S]. Na tym wykresie przędę z osią x odpowiada wartości V_maXr a nachylenie linii jest równe -1 /K_Vt Dla wielu enzymów model Michaelisa-Menten stanowi bardzo dóbr. model danych doświadczalnych, ale istnieją enzymy, które nie podlega-,ą kinetyce Michaelisa-Menten. Enzymy te, np. karbamoilotransferaza aspa-raginianowa (ATCaza), są nazywne enzymami allosterycznymi (patrz temat C5).

InhibiciJ

Hasła

Inhibicja enzymu	KatafiM inhiflbminjB
	zwykle a
	Rozryimn niecek™ rc: z ud
Inhibicja	InhiizśSaffll
nieodwracalna	z reszitamn
	inafcjftnwfflfl
	diizzy:":.i!j per.: r :ai
Odwracalna inhibicja kompetycyjna	Inh:r......! o wiąziai kon-perta Na wyiaj kompeif
Odwracalna inhibicja niekompetycyj na	Inhirrrrr miejsce ;a powoAm ' Wpływa* przez dra inhibitor wartości

Tematy pokrewne

StruJkraffial (Al Oczyszo® Wpromaifl

unr nibicja enzymu

Istnieje wid| ści dar-e z w kiei inhibitor PI kowym: « kontroli obcymi SI hamowani™ letalne. Roal calną i odnml