enzymy16

110 Sekcja C - Enz-wiimfl Kinetyka enzymów

Wykres

Lineweavera-Burka

Tematy pokrewne

Szybkość działania enzymu

równa stosunkowi sumy szybkości rozkładu kompleksu enzym-substrat do szybkości jego powstawania oraz stanowi miarę powinowactwa enzymu do substratu.

Wartości V_max oraz K_m można wyznaczyć doświadczalnie, mierząc V przy różnych stężeniach substratu, a następnie wykreślając 1/Vq jakc funkcję 1 / [S] w wykresie odwrotnościowym, czyli wykresie Lineweavera-Burka. Przecięcie na osi y jest równe wartości 1/V'_maX/ przecięcie na osi x jest równe -1 /K_m, a nachylenie krzywej jest równe wartości K_m/V_max.

Struktura białek (B3) Wprowadzenie do enzymów (Cl) Termodynamika (C2)

Inhibicja enzymów (C4) Regulacja aktywności enzymatycznej (C5) Łańcuchowa reakcja polimerazy (16)

Tempo przebiegu reakcji katalizowanej przez enzym jest określane y. szybkość reakcji. Szybkości działania enzymu podaje się zazwyczaj j« wartości w czasie zerowym (początkowa szybkość reakcji, symbol |imol-min^_1), bowiem szybkość jest największa wtedy, gdy nie ma jes; produktu. Dzieje się tak dlatego, że w nieobecności produktu nie mc wystąpić efekt hamowania przez sprzężenie zwrotne własnym prodi tern — co jest częstym zjawiskiem w enzymach — ani też reakqa nie mc przebiegać w kierunku odwrotnym, zasilanym przez produkt, uniknąć wpływu wymienionych zjawisk, pomiaru Vq dokonuje się, zć więcej niż około 10% substratu zostanie przekształcone w prodi Typowy wykres powstawania produktu jako funkcji czasu dla real katalizowanej enzymatycznie wykazuje początkowy okres szybkie narastania produktu, co odpowiada prostoliniowemu odcinkowi wyl su (rys. 1). Po okresie tym następuje stopniowe zwalnianie szybkc działania enzymu w miarę zużywania substratu i/lub osłabienia akt) ności enzymu. Wartość Vo uzyskuje się, kreśląc linię prostą styczną początkowego odcinka krzywej, poczynając od czasu zerowego (rys. i) nachylenie tej prostej ma właśnie wartość Vq.

Jednostki

Aktywność

bardziej pcw.....”

zowanej pmol-mir.^-] matyczne jja matyczną jjest stratu w enzymu. kr zdefiniowaną reakcji w spec aktywność: ni 1 pmol-mir ” \ całkowita ad w próbce ma tyczm. :r d jest miarą n>"3 a staje się rmuEu!

Normalny mi stratu ([5]«pi nie [S] pcw « większych sus [S] powoduje wysycający enzymu żarna enzymu jest wać z e wpływu. 1 jest nazywa®

Rys. 1. Zależność między powstawaniem produktu a czasem trwania reakcji katalizowanej przez enzym

Temperatura

Rys. 2. Zaiez~.cs

Gdy się; mu mają r j podwojenie

przedstav.n=:i;ą

Temperatura

w dwojak: spnt