Ocena reakcji serologicznej w mikrometodach Gel-test i BioVue System
Reakcja ujemna
Reakcje dodatnie
0
+1 +2 +3 +4
Nasilenie reakcji aglutynacji w mikrometodach wyraża się, stosując cyfry od Odo 4
1.1. Przygotowanie stanowiska pracy
• kasety z mikroprobówkami serologicznie obojętnymi
• kasety z mikroprobówkami zawierającymi surowicę antyglobulinową
• mikropipeta regulowana o poj. 10,25,40, 50 pi
• statywy firmowe na kasety
• wirówka firmowa o ściśle wystandaryzowanych parametrach
• probówki szklane lub plastikowe o pojemności 5 ml
• statywy na probówki
• pisak do pisania na szkle
• środek odkażający
• pojemnik na materiał przeznaczony do utylizacji
• inkubator firmowy (temp. 37°C) lub cieplarka
• odczynnik papainowy firmowy lub bromelina
• odczynnik LISS firmowy lub produkcji RCKiK w Katowicach
• krwinki wzorcowe
102
I
serologia grup krwi w praktyce
(DORh+ DCwCee kk Fy(a+b-) Jk(a+b-) MN ss P1 Le(a+b-)
(2) 0 Rh+ DccEE kk Fy(a-b+) Jk(a-b+) NN SS P, Le(a-b+)
(3) 0 Rh- dccee Kk Fy(a+b+) Jk(a+b+) MM Ss P2 Le(a-b-) 1 1.2. Przygotowanie materiału do badań (krwinek wzorcowych, krwinek dawców i próbki badanej)
. nróbke badaną wirować przez 3 min. z prędkością 340-680 g (około 1500-2000 obr./min.)
. odciągnąć surowicę badaną (biorcy) do oddzielnej probówki . sporządzić odpowiednie zawiesiny krwinek - 0,8% zawiesiny w roztworze
LISSdo mikroprobówekzżelem, stosując 10 pl osadu krwinek i 1 ml odczynnika LISS oraz 3% zawiesiny w roztworze PBS do mikroprobówek z ziarnami szklanymi, stosując 1 kroplę gęstych krwinek i 32 krople roztworu PBS:
- krwinek wzorcowych grupy 0 Rh+ DCCee (1)
- krwinek wzorcowych grupy 0 Rh+ DccEE (2)
- krwinek wzorcowych grupy 0 Rh- ddcceeK (3)
- krwinek badanych
- krwinek dawców
• odczynnik papainowy używany do papainowania rozcieńczyć roztworem PBS lub NaCI w stosunku 1:9
• krwinki przygotowywane do papainowania przemyć roztworem PBS
• do jednej kropli gęstych krwinek dodać cztery krople rozcieńczonego odczynnika papainowego
• całość inkubować w temperaturze 37°C przez czas ustalony dla danej serii odczynnika papainowego - czas papainowania
• krwinki przemyć trzykrotnie dużą objętością roztworu PBS
• sporządzić 3-5% zawiesiny krwinek w roztworze PBS
serologia grup krwi w praktyce I 103