skan45

Ocena reakcji serologicznej w mikrometodach Gel-test i BioVue System

Reakcja ujemna 0

+1

Reakcje dodatnie +2    +3

+4

Nasilenie reakcji aglutynacji w mikrometodach wyraża się, stosując cyfry od Odo 4

1.1.    Przygotowanie stanowiska pracy

1.1.1.    Sprzęt laboratoryjny i odczynniki

•    kasety z mikroprobówkami serologicznie obojętnymi

•    kasety z mikroprobówkami zawierającymi surowicę antyglobulinową

•    mikropipeta regulowana o poj. 10,25,40, 50 pi

•    statywy firmowe na kasety

•    wirówka firmowa o ściśle wystandaryzowanych parametrach

•    probówki szklane lub plastikowe o pojemności 5 ml

•    statywy na probówki

•    pisak do pisania na szkle

•    środek odkażający

•    pojemnik na materiał przeznaczony do utylizacji

•    inkubator firmowy (temp. 37°C) lub cieplarka

•    odczynnik papainowy firmowy lub bromelina

•    odczynnik LISS firmowy lub produkcji RCKiK w Katowicach

•    krwinki wzorcowe

102

serologia grup krwi w praktyce

przykład zestawu produkcji RCKiK Katowice:

(1)    O Rh+DC^wCee kk Fy(a+b-) Jk(a+b-) MN ss P₁ Le(a+b-)

(2)    O Rh+ DccEE kk Fy(a-b+) Jk(a-b+) NN SS P₁ Le(a-b+)

(3)    O Rh- dccee Kk Fy(a+b+) Jk(a+b+) MM Ss P₂ Le(a-b-)

1.1.2.    Przygotowanie materiału do badań (krwinek wzorcowych, krwinek dawców i próbki badanej)

•    próbkę badaną wirować przez 3 min. z prędkością 340-680 g (około 1500-2000 obr./min.)

•    odciągnąć surowicę badaną (biorcy) do oddzielnej probówki

•    sporządzić odpowiednie zawiesiny krwinek - 0,8% zawiesiny w roztworze

LISS do mikroprobówek z żelem, stosując 10 pi osadu krwinek i 1 ml odczynnika LISS oraz 3% zawiesiny w roztworze PBS do mikroprobówek z ziarnami szklanymi, stosując 1 kroplę gęstych krwinek i 32 krople roztworu PBS:

-    krwinek wzorcowych grupy 0 Rh+ DCCee (1)

-    krwinek wzorcowych grupy 0 Rh-ł- DccEE (2)

-    krwinek wzorcowych grupy 0 Rh- ddcceeK (3)

-    krwinek badanych

-    krwinek dawców

1.1.3.    Przygotowanie krwinek papainowanych do testu enzymatycznego

•    odczynnik papainowy używany do papainowania rozcieńczyć roztworem PBS lub NaCI w stosunku 1:9

•    krwinki przygotowywane do papainowania przemyć roztworem PBS

•    do jednej kropli gęstych krwinek dodać cztery krople rozcieńczonego odczynnika papainowego

•    całość inkubować w temperaturze 37°C przez czas ustalony dla danej serii odczynnika papainowego - czas papainowania

•    krwinki przemyć trzykrotnie dużą objętością roztworu PBS

•    sporządzić 3-5% zawiesiny krwinek w roztworze PBS

serologia grup krwi w praktyce B 103