Równocześnie zbadano aktywność nośnika. W tym celu odważono 20% (640 mg) nośnika i przeniesiono do zlewki, do której dodano 1 ml wody i 1 ml 0,2 molowego roztworu sacharozy Tak przygotowany reaktor inkubowano w łaźni wodnej z mieszaniem w temp. 37°C, pobierając próbki po 4, 6 i 8 minutach. Następnie zmierzono absorbancję próbek po reakcji z odczynnikiem miedziowym:
Próbka |
Absorbancja |
4’ |
0.295 |
6’ |
0,875 |
8’ |
1,03 |
AAr-4- = 1,03 - 0,295 - 0,735
Absorbancji 0,735 odpowiada 1,08 pmola cukrów redukujących.
1,08 (imola cukrów red./2 = 0,54 (unola sacharozy 0,54 Mmola sacharozy/4 min = 0,135 (wiola sacharozy/min 0,135 (wiola sacharozy/min * 10 = 1,35 (wiola sacharozy/min 1,35 (wiola sacharozy/min * 5 = 6,75 (unola sacharozy/min 6,75 (wiola sacharozy/min * 10 = 67,5 U/g
Aktywność nośnika wynosi 67,5 U/g.
Następnie, w sposób identyczny jak przy wolnym enzymie, oznaczono aktywność przesączy:
Przesącz I:
Objętość: 16 ml
Próbka |
Absorbancja |
4’ |
0,45 |
6’ |
1.36 |
8’ |
3,75 |
AAsm' “ 3,75 - 0,45 = 3,3
Absorbancji 3,3 odpowiada 4,84 (wiola cukrów redukujących.
4,84 (wiola cukrów red./2 = 2,42 (wiola sacharozy 2,42 (wiola sacharozy/4 min = 0,605 (wiola sacharozy/min 0,605 (wiola sacharozy/min * 10 = 6,05 (unola sacharozy/min 6,05 (unola sacharozy/min * 16,0 = 96,8 (unola sacharozy/mi 96,8 (unola sacharozy/min * 10 = 968,0 U/g