IMG078 (3)

■

■

0

0

0

0

Fagocytoza

Ćwiczenie 1. TEST POCHŁANIANIA I REDUKCJI NBT

Materiały:

1.    heparynowana krew bydlęca

2.    0,1% roztwór błękitu nitrotetrazoliowego (NBT) w PBS

3.    probówki Eppendorfa 1,5 ml

4.    czyste szkiełka podstawowe

5.    alkohol metylowy

6.    barwnik Giemsy (1:20)

7.    pipeta automatyczna 1000

8.    tryskawka z wodą destylowaną

Wykonanie

•    W probówce zmieszać 0,5 ml krwi i 0,5 ml roztworu NBT

•    Mieszaninę inkubować w łaźni wodnej o temp. 37 oC przez 30 minut

•    Wyjąć probówkę i inkubować mieszaninę w temperaturze pokojowej przez 15 minut

•    Wykonać rozmaz krwi na szkiełku podstawowym, wysuszyć

•    utrwalić preparat w alkoholu metylowym przez 5 minut, wysuszyć

•    wysuszony preparat barwić przez 15 minut barwnikiem Giemsy (1:20)

•    preparaty spłukać wodą destylowaną i ponownie wysuszyć

•    preparaty oglądać pod imersją

Obliczyć ilość neutrofilów ze złogami niebieskiego barwnika na ogólną liczbę 100 wyszukanych w preparacie neutrofilów

0

0