c. Nalać na rozmaz odczynnik Lugola. Pozostawić na 1 min.
d. Spłukać odczynnik Jugola wodą z tryskawki.
e. Odbarwić 95% etanolem do momentu aż barwnik nie będzie spływał ze szkiełka (ok.20 sek)
f. Spłukać wodą wszystkie resztki odczynnika odbarwiającego
g. Nalać na rozmaz fuksynę karbolową. Pozostawić na 1 minutę.
h. Spłukać preparat wodą. Odsączyć preparat i zbadać go mikroskopowo z użyciem obiektywu immersyjnego.
Wyniki:
Organizm, który zatrzymujlrjbarwnik pierwotny będzie w mikroskopie ciemno-fioletowy i będzie określany jako Gram-dodatni. Organizm, który się odbarwił i dlatego zaabsorbował barwnik kontrastowy, będzie maił w mikroskopie kolor różowy i będzie określany jako Gram-ujemny.