Scan2

utleniony i gotowy do przyjęcia elektronu, Zacienienie powinno trwać około 20 minut. Międzyczasie montujemy fluorymetr (podłączamy światłowód), łączymy aparat z laptopem zawierającym odpowiedni program. Po włączeniu aparatu w jego wyświetlającym okienku przyciskamy napis PC - aparat przenosi odczyty na komputer. Włączamy program w komputerze, otwieramy na ekranie okienko wyświetlające zmierzone i wyliczone przez aparat wartości parametrów. Uruchamiamy światło pulsacyjne, widać na końcu światłowodu pulsujące słabe światło. Dołączamy światłowód do klipsa, przytrzymujemy palcami, żeby między światłowodem a klipsem nie było szpary, odsuwamy blaszkę, umożliwiając dojście światła do liścia. Słabe pulsacyjne światło indukuje nam fluorescencję określaną jako Fo. Po paru sekundach klikamy w Fv/Fm. Mocny błysk światła wysycającego indukuje nam fluorescencję maksymalną Fm a aparat wylicza sprawność całkowitą PSII (Fm-Fo/Fm), jej wartość pojawia się w okienku. Po paru sekundach przyciskamy AC (światło aktyniczne) -początkowo uzyskujemy na krzywej wzrost fluorescencji, która z czasem się stabilizuje (czekamy tak długo jak długo malowana krzywa nie będzie równoległa do osi X). Po tym czasie przyciskamy <f> PSII po błysku wysycającego światła na polu z odczytami pojawiają nam się wartości interesujących nas parametrów cj> PSII, qP i qNP

a.    porównanie parametrów fluorescencyjnych u roślin kontrolnych i traktowanych systemicznym herbicydem rozprzęgającym transport elektronów . Dokonujemy pomiarów, jak opisano powyżej, na liściach ogórka kontrolnego i traktowanego herbicydem symazyną w stężeniu 5 mM

Materiał roślinny; trzy tygodniowe ogórki kontrolne i traktowane przez 24 i 72 godziny 5 mM symazyną

b.    porównanie parametrów fluorescencyjnych u roślin kontrolnych i poddanych stresowi metali ciężkich.

Materiał roślinny: te same ogórki, używane przy pomiarach wymiany gazowej 3.Tworzenie się skrobi na świetle (próba jodowa).

Ustawiamy rośliny na dwa dni w ciemności. (Przy braku fotosyntezy następuje zużycie skrobi zapasowej). Po tym czasie zasłaniamy liść czarnym szablonem z wyciętym otworem (można zastosować „klipsy" z wyposażenia do fluorymetru FMS2) i wystawiamy liść rośliny na działanie silnego światła. Po około 2-3 godzinach, gdy wytworzyła się już skrobia asymilacyjna a nie ma jeszcze zapasowej, odcinamy liść. Zdejmujemy szablon (lub „ klipsy') i liść wrzucamy do wrzącej wody. Gotujemy ok. 8 minut. Następnie liść wkładamy do zlewki z etanolem. Wkładamy zlewkę z etanolem i liściem do wrzącej łaźni wodnej i gotujemy aż do odbarwienia liścia (około 10 minut). Wyciągamy liść pęsetą i umieszczamy liść na szalce Petriego i zalewamy płynem Lugola. Po zabarwieniu roztwór Lugola zastępujemy wodą destylowaną.

Miejsca na liściu zasłonięte nie zabarwiają się. Obserwujemy ciemne zabarwienie liścia w miejscach niezasłoniętych. Świadczy to o wytworzeniu się w tych miejscach skrobi asymilacyjnej, która wykazuje charakterystyczne zabarwienie w kontakcie z J w KJ

Materiał roślinny; trzytygodniowe ogórki, słoik z roślinami dwa dni przed ćwiczeniami umieszczamy w ciemnym termostacie.

Potrzebne dwie łaźnie do 100 stopni C, skażony alkohol, płyn Lugola, pensety, zlewki i duże płytki Petriego