skanowanie0032 (24)

Po redukcji obecnych w moczu 17-KS do alkoholi przeprowadza si^ioksydację 17-OHKS do KS.

Reakcja redukcji zachodzi w środowisku zasadowym pod wpływem NaBH<t, a reakcja oksydacji w obecności NaI04.

Powstające 17-KS są izolowane z moczu przy użyciu kolumn chromatograficznych i oznaczane w reakcji z m-dinitrobenzenem.

1.    tyrozyna, fenyloalanina

2.    adrenalina, noradrenalina, dopamina

3.    metanefryny, normetanefryny

4.    kwas wanilinomigdałowy

1. dopamina

2.    noradrenalina (hydroksylacja) —* normetanefryna —* kwas wanilinomigdałowy (VMA)

3.    adrenalina (metylacja) —► metanefryna —> kwas wanilinomigdałowy (VMA)

KWAS WANILINOMIGDAŁOWY (VMA)

-    główny produkt metabolizmu amin katecholowych

-    stanowi 75% metabolitójpamin katecholowych nadnerczy

-    wydalany z moczem

T wydalania VMA z moczem:

guz chromochlonny nadnerczy (pheochromocytoBa) WSBM zwojak współczulny (neuroblastom)

Metody oznaczania VMA

Izolacja VMA z moczuHmetoda chromatografu kolumnowej

Pomiar spektrofotometryczny stężenia waniliny powstałej w utlenieniu VMA nadjodanem sodu. Materiał badany: mocz

DZM przeprowadzamy do naczynia zawierającego 15 ml 20% HC1. Mocz pomiędzy poszczególnymi zbiórkami w ciągu doby powinien być przechowywany w lodówce. Przechowywanie: 7 dni w temperaturze 2-4°C lub 3 miesięcy miesięcy stanie zamrożenia Uwagi:

Na 3 dni przed badaniem pacjenci nie powinni spożywać bananów, czekolady, kawy, owoców cytrusowych oraz przyjmować salicylanów.

Metody oznaczania VMA ttest kolumnowy!

1.    zmierzoną objętość moczu doprowadzić do pH 1,5 - 3,5

2.    po zneutralizowaniu próbkę moczu nanieść na kolumnę z jonowymieniaczem anionowym.

3.    przemyć kolumnę w celu usunięcia substancji interferujących .

4.    nanieść na kolumnę bufor do elucji, uwalniający związany z wymieniaczem VMA.

5.    doprowadzić pH buforem węglanowym do wartości 11.

6.    dodać nadjodan sodu do próbek badanych w celu utlenienia VMA do waniliny.