IMG96

Tabela 14. Objętości (XI M roztworu tiosiarczanu sodowego i odpowiadające im ilości cukru redukującego w mg w metodzie Lufla-Schoorla

Objętość (XI M

Dziesiętne części cm¹ 0,1 M Na₂S₂0₃

•jSjOj cm*]	0	1	2	3	4	5	6	7	8	9
0	0.0	03	*6	1,0	1,3	1,6	1,9	2.2	2,6	2,9
1	33	33	3,8	4,2	4,5	4,8	5,1	5,4	5,7	*1
2	6,2	*7	7,1	7,4	7,7	8,1	8,4	8,7	9,0	9,4
3	9.7	1*0	1*4	1*7	11,0	11.4	11,7	12,0	12,3	12,7
4	13,0	133	13,7	14,0	14,4	14,7	15,0	15,4	15,7	1*1
5	16.4	1*7	17,1	17,4	17,8	18,1	18,4	18,8	19,1	19,5
6	19,8	2*1	2*5	2*8	213	24,5	21,8	22,2	22,5	22,9
7	23,2	23,5	23,9	24,2	24,6	24,9	25,2	25,6	25,9	2*3
8	2*5	2*9	27,3	27,6	28,0	28,3	28,6	29,0	29,3	29,7
9	29,9	3*3	3*7	31,0	31,3	31,7	32,0	32,4	32,7	33,0
10	33,4	33,7	34,1	34,8	35,1	35,4	35,8	3*1	3*1	3*5
11	3*8	373	373	37,9	38,2	38,6	38,9	39,3	39,6	4*0
12	40,3	4*7	41,0	41,4	41,7	42,1	42,4	42,8	43,1	43,5
13	43,8	443	44,5	44,9	453	45,6	45,9	4*3	4*6	47,0
14	47,3	47,7	48,0	48,4	48,7	49,1	49,4	49,8	5*1	5*5
1S	3*8	31,2	51,5	51,9	523	52,6	52,9	53,3	53,6	54,0
16	54,3	54,7	55,0	55,4	1 55,8	5*2	5*6	5*9	57,3	57,6
17	58,0	38,4	58,8	59,1	59,5	59,8	6*3	6*7	61,0	61,4
18	6m	62,2	62,5	623	633	63,7	64,0	64,4	64,8	65,1
19	65,5	65,9	6*3	6*7	67,1	67,5	67,8	68,2	68,6	69,1
20	69,4	69,8	7*6	7*2	71,0	71,4	71,7	72,1	72,5	72,9
21	733	73,7	74,1	743	74,9	753	75,6	7*0	7*4	7*8
22	773	77,6	78,0	78,4	78,8	793	79,6	8*0	8*4	8*8
23	81,2	81,6	82,0	82,4	823	83,2	83,6	84,0	84,4	84,8
24	85,2	83,6	8*0	8*4	8*8	87,2	87,6	88,0	88,4	88,8
23	89,2	89,6	9*0	9*4	9*8	91,2	91,6	92,0	92,4	92,8

Jodometryczne oznaczanie zawartości aldoz obok ketoz metodą Wil-ktattera. Do czystej kolby stożkowej o pojemności 25 cm³ pobrać 1 cm³ odbiałczonej próby, dodać 3 cm³ 0,01 M roztworu jodu i 3 cm³ wody dla spłukania ścian kolby, po czym dodać 0,3 cm³ 5°/₀ roztworu węglanu sodowego. Kolbę zamknąć korkiem i odstawić na 30 min.

Po tym czasie dodać 0,5 cm³ 0,5 M roztworu kwasu siarkowego i miareczkować 0,005 M roztworem tiosiarczanu sodowego. Pod koniec miareczkowania (gdy barwa roztworu słabnie) dodać kroplę 0,1 °/_Q roztworu skrobi i miareczkować do odbarwienia.

Równocześnie wykonać próbę odczynnikową, używając w miejsce próby badanej odpowiednią ilość wody destylowanej.

Zawartość aldoz w przeliczeniu na glukozę, a wyrażoną w mg % glukozy (x), obliczyć według wzoru:

0,45 (K—    • r * 100

x =-,

m

gdzie V oznacza objętość tiosiarczanu sodu zużytą do zmiareczkowania próby odczynnikowej w cm³, V_x — objętość tiosiarczanu sodu zużytą do zmiareczkowania próby właściwej w cm³, m - odważkę produktu w mg. r -wielokrotność rozcieńczenia próby, 0,45 - masę glukozy odpowiadającą 1 cm³ 0,005 M tiosiarczanu sodu w miligramach.

Odczynniki specjalne:

1) Roztwór jodu 0,01 M. W kolbie miarowej o pojemności 100 cm³ rozpuścić w ok. 60 cm³ wody destylowanej 10 g jodku potasowego oraz 5 g jodu i uzupełnić do kreski. Przed użyciem rozcieńczyć 5-krotnie.

Kolorymetryczne oznaczanie zawartości ketocukrów metodą rezorcynową

Sporządzenie krzywej wzorcowej. Przed użyciem roztwór wzorcowy fruktozy rozcieńczyć 10-krotnie. Do 7 probówek pobrać pipetą kolejno: 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 7,0; i 9,0 cm³ 0,01% roztworu fruktozy. Następnie do każdej z probówek dodać po 1 cm³ odczynnika rezorcynowego i po 7 cm³ roztworu kwasu solnego (5:1). Zawartość probówek wymieszać i wstawić do łaźni wodnej o temperaturze 80° C na 10 min. Po tym czasie wyjąć i wstawić na 5 min. do zlewki z zimną wodą.

Odczytać wartość absorpcji na spektrofotometrze przy długości fali k = 520 nm. Próbą odniesienia jest roztwór odczynnika. Wykreślić krzywą wzorcową, odkładając na osi rzędnych wartości absorpcji, a na osi odciętych stężenie fruktozy wyrażone w mg %•

Oznaczanie w badanej próbie.

W trzech probówkach umieścić po 1 cm³ badanego roztworu po odbiał-czeniu. Dalsze postępowanie analogiczne, jak przy sporządzaniu krzywej wzorcowej. Z krzywej wzorcowej odczytać zawartość ketoheksoz w mg %.

Odczynniki specjalne:

1)    Odczynnik rezorcynowy. W 100 cm³ kwasu octowego lodowatego rozpuścić 0,1 g rezorcyny i 0,25 g tiomocznika. Odczynnik trwały. Przechowywać w butelce z ciemnego szkła.

2)    Wzorcowy roztwór fruktozy. W kolbie miarowej o pojemności 100 cm³ rozpuścić w około 60 cm³ wody destylowanej 100 mg fruktozy cz. d. a. i uzupełnić wodą do kreski.

179