Na pytanie, czy badany ślad krwi pochodzi od mężczyzny, < ty kobiety, inoZna z łatwością odpowiedzieć wówczas, kiedy badane plamy sąświeży mi śladami krwi roztartej na szkle. Wystarczy odpowiednio zabarwić preparat barwnikami akrv-dynowyini i w mikroskopie fluorescencyjnym postukiwał1 2- rhrńniosomu Y (cial-ko Y) w komórkach jądrowydi krwi. Wynik pozytywny można uzyskać wówczas wciągu miesiąca od powstania plamy. W każdym innym przypadku materiał z podłoża trzeba uprzednio wypłukać surowicą osobnika AB. Jeżeli stwierdza się co najmniej 10% jąder komórkowych z ciałkami Y, można rozpoznać krew pochodzącą od osobnika z kariotypem 46, XY, czyli z reguły od mężczyzny.
Ustalenie, czy ślad krwi pochodzi od,dziecka, czy osoby dorosłej, obecnie nie jest
U#l»/ ■
Ślady nasienia na bieliźnie lub innych/częśclach garderoby charakteryzuj mt nieregularnym kształtem, szarożółtą barwą i częściowym usztywnieniem tkaniny Fluoryzują w świetle nadfioletowym. Podobną fluorescencję wykazują jednak również: wydzielina z pochwy, mocz oraz śluz z nosa. Zaplamiony materiał |>< |ego uprzednim wysuszeniu, jeżeli jest wilgotny — przesyła się do laboratorium w opakowaniu zabezpieczającym przed uszkodzeniem mechanicznym.
Najważniejszą i najczulszą próbą wstępną, pozwalającą na wyKrycie nam/u
małych ilości nasienia (0,1 mm2 zaplamienia na tkaninie), jest próba na obe<......,
losfatazy kwaśnej, która pochodząc z prostaty stanowi domieszkę nasieniu Stężenie fosfatazy w nasieniu jest 500—1000-krotnie większe od stężeniu t«mj< • enzymu w innych płynach ustrojowych i wydzielinach. W odróżnieniu od losłuto , kwaśnej erytrocytów fosfataza w nasieniu wykazuje zanik aktywności pod wply
Dla wykrycia fosfatazy w śladzie Wykorzystuje się właściwość enzymu poleguji ą na uwalnianiunlfa-naftolu z połączeń fosforanowych. JJwglniony związek mu;iw uwidocznić przez wybarwienie. W próbach orientacyjnych stosuje się nieraz gotowe testy bibułowe, będące również w posiadaniu organów śledczych. W Ala dach suchych, przechowywanych w chłodzie, można nawet po kilku latach uzysk.«
wynik pozytywny. ^--->
Badając treść z pochwy po dokonaniu zgwałcenia, stwierdza się zawartość losfatazy znacznie większą od normy, tj. od stężenia stwierdzanego z reguły w wydzielinie pochwy. Aktywność fosfatazy nasienia wprowadzonej do pochwy może utrzymać się od kilku godzin do kilku dni u kobiet żyjących, natomiast w pochwie zmarłej ofiary gwałtu — od 7 dni do,2 miesięcy.
Wykazanie obecności plemników w badanym śladzie jest niepodw ym down dem, że jest to plama nasienia. W tym celu wykonuje się wyciąg z plam w fizjologicznym roztworze soli kuchennej lub w wodzie, a z osadu sporządza się wymaz, oglądany pod mikroskopem w postaci nie zabarwionej albo barwione) •rytrozyną, fuksyną kwaśną lub błękitem metylowym. Pełną wartość dowodową ma wyłącznie stwierdzenie całych plemników, wraz z główką i ogonem. Z kolei wynik ujemny nie jest dowodem przeciwnym, gdyż ślad nasienia może pochodź u od osobnika wykazującego oligo- lub azoospermię. W przypadku gdy ślad znajduje się na cienkim i jasnym materiale, dokonuje się bezpośrednich oględzin za plamionego materiału pod mikroskopem, Oględziny muszą być wówczas poprze dzone barwieniem śladu wraz z podłożem erytrozyną, a następnie rozdrobnieniem materiału na poszczególne włókna. Widoczne są wówczas czerwono zabarwione główki plemników na tle nie zabarwionych włókien tkaniny.
Możliwe Wyjątek stanowi krew noworodka, której ślady otrzymuje się nieraz do badań w związku z podejrzeniem dzieciobójstwa albo niedozwolonego przerwania ciąży. Do różnicowania takiej krwi od krwi osoby dorosłej służy odmienna szybkość wędrowania hemoglobiny płodowej (HbF) i hemoglobiny dorosłych (HbA) w czasie elektroforezy, a także oznaczanie obecności alfa, -fetoproteiny metodami immunoelektroforetycznymi. Tą ostatnią metodą pozytywne rezultaty uzyskuje się przez okreś 10 miesięcy?2-
Na ogół bezowocne okazały się próby możliwie dokładnego ustalenia czasu powstania plamy krwi. Z pewnym przybliżeniem można ten czas określić na podstawie: aj stopniowej zmiany czerwonej barwy krwi na barwę brunatną, b) zmniejszającej się rozpuszczalności wyschniętej krwi? Stosunkowo najlepsze rezultaty daje rejestracja zmian_zachQdzących w widmie absorpcyjnym
Hb. - fr~ -—---
' Wyjątkowo rzadko udaje się określić ilość krwi wynaczynionej. Najprościej jest zważyć zeskrobaną substancję lub zważyć materiał zaplamiony i porównać go z masą nie zaplamionego podłoża. Tak otrzymaną masę suchej substancji krwi przelicza się na pierwotną objętość krwi.
Wykazanie obecności gonadotropiny kosmówkowej (HCG} w śladzie krwi może dowodzić, że pochodzi on od kobiety ciężarnej. Z powodu większego stężenia gonadotropiny w pierwszych miesiącach ciąży można stwierdzić HCG nawet w starych plamach krwi (średnio do trzech tygodni) wynaczynfOlieJ w czasie przerwania ciąży, podczas gdy we krwi z okresu porodu pozytywne rezultaty uzyskuje się wyłącznie podczas badania plam świeżych. Morfologicznie można nieraz wykazać w wymazach wyciągu ze śladu obecność kosmków łożyska, meszku lub komórek doczesnej ciążowej.
r Krew pochodząca z uszkodzonych dróg rodnych może zawierać domieszkę
komórek nabłonka pochwy, wykazujących obecność-glikogenu. Pozytywny wynik barwienia jodem w jodku potasowym mogą jednak wykazywać również niektóre inne jcomórki zawierające alikooen, m.in. komórki moczowodu i głębokich warstw błony śluzowej jamy ustnej. Bardzo rzadko udaje się stwierdzić, czy plama krwi powstała wskutek krwawienia z nosa lub w następstwie krwotoku płucnego. Pomocne może być wykazanie składników morfologicznych, charakterystycznych dla danego źródła krwawienia.
Próby wykorzystania dużej aktywności fibrynolitycznej krwi menstruacyjnej w badaniu śladów krwi w celu wykazania źródła krwawienia nie powiodły się.