44642 IMG 1404015029

Dery

■elu dopro

'watyz*cja kryształów białek

J\3-

&

łzie hydrolizuje, a po lekkim ogrzaniu tw_0r> ii_an), który w    j/_śli żelowaniu poddamy warstwy

żel krzemionkowy )-_kastrącającego i buforu, _{a na} w?' -_M,

S du, * ^roZtłtfriioru białka, _Po odpowiednim czasie d_yf^> Smy warstew^ J _spotkania białka i czynruka strącając^S,-

■    nH stawienia izomorficznego MIR wymagane w „

W metodzie p _niezmienionej strukturze, z przyłączonym kryształu    _dkowany jonami atomów ciężkich. W klas_VcJ^

selektywny ^up _kiwanie pochodnej, a więc derywatyzację, prouS _dzie Perutza u    _{dęflddŁ De}rywatyzację można prowadzi^'

^P°^bv albo przez ponowną krystalizację białka w obecności soli^

^Sp° ,,, żolizacial albo przez nasączanie w roztworze odpowiedź ^(WSP h tiształów białka natywnego. Dla pełności obrazu doJS* znakowanie białka odpowiednim pierwiastkiem jest też możliwej czysto chemicznej (np. jodowanie reszt tyrozyny) lub metodami ^ nacyjnymi, pozwalającymi np. zastąpić metioninę selenometioniną^

pie biosyntezy białka.    ......

Do derywatyzacji metodą Perutza najczęściej stosuje się sole rtęci, doskonale wiąże się z ugrupowaniami siarkowymi białek. Stosowane od-czynniki to nie tylko sole nieorganiczne, jak HgCl2, ale również pochodr.e organortęciowe, jak chlorek etylortęci. Wszystkie omawiane tu związki _s, trujące, ale toksyczność organicznych pochodnych rtęci jest wprosimy obrażalna. Dlatego praca z tymi substancjami, nawet w mikroskopijny* ilościach, wymaga nadzwyczajnych środków ostrożności.

Stosowana w postaci związków kompleksowych (np. KzPtCli) piaty wykazuje duże powinowactwo do ugrupowań aminowych. Z resztami kwasowymi natomiast chętnie wiąże się bardzo ciężki kation uranylowy (U0₂)²⁺. Stosuje się też sole złota czy osmu. Wdzięczną grupę stanowią lam tanowce, których podobny lecz nie jednakowy charakter chemiczny powala na dobranie optymalnego do derywatyzacji jonu. Popularne staje aę ostatnio zastosowanie egzotycznego, niezwykle ciężkiego (856 elektronów; kompleksowego jonu dodekabromoheksatantalu, otrzymywanego zw) ^e w postaci soli bromkowej (Ta₆Bri2)Br₂.

Dobry chemik nie przeoczy możliwości derywatyzacji przez^zast^ naturalnego składnika białka cięższym „kuzynem", np. wapń można pić bardzo ciężkim barem, a cynk - ołowiem.

cjas

nas<

.że

tO‘

cr

ZabezP

Ze wzg wyjęte miast z legał n kropel! kachk

szy sp> nylonc łembł turze w kry oraz t todzń tyle t pętel!

P

cierz

unie

140