302 (26)

Tabela 12.1

Ważmeji/e metod) frakcjonowana biopolimerów

Podstawa metod)

1.    Reakcje organa:

strącam w punkcie i/oelekt/ycznym strącam* rozpus/c/almkami strącanie solami obojętnymi

2.    Rozdział wielokrotny (rozdział według Craiga)

3.    Chromatografia rozd/ick/a

4.    Dializa i uhrafiltracja

5.    Chromatografia Zelowa:

MC zenie Żelowe

permeac)jna chromatografia Zelowa

6.    Metody oparte na wirowaniu

7.    Elektroforeza

elektroforeza swobodna elektroforeza na nośniku elektroforeza Zelowa elektroforeza dyskowa ogniskowanie izoelektryczne izotachoelektroforcza immunoelektroforc/j

8.    Chromatografu jonowymienna

9.    Chromatografia powinowactwa

różna rozpuszczalność

różna rozpuszczalność

różna rozpuszczalność

różna wielkość cząsteczek

różna wielkość i kształt cząsteczek

różna wielkość, ciężar właściwy i kształt cząsteczek różny ładunek

różny ładunek oraz różnice biospecy-ficzne

róZn) ładunek

bioselckt) wne oddziaływania wzajemne między białkiem a ligandem

ślcnie masy cząsteczkowej. Należą do nich przede wszystkim: chromatografia ido-h a (sączenie żelowe), metody oparte na wirowaniu oraz elektroforeza.

12.2.1. Sączenie żelowe

Za pomocą chromatografii idowęf przeprowadza się frakcjonowanie ze względu na w ielkość luMi) kształt cząsteczek głównie białek i wielocukrów oraz produktów ich hydrolizy (peptydy, oligocukry). Najczyściej rozdział ten jest realizowany przy stosowaniu fazy wodnej i nazywany toczeniem Żelowym.

Frakcjonowanie przeprowadza się przy użyciu kolumny, której fazę stacjonarną stanowią elementy przestrzenne w formie imcciowancgo żelu wielocukrowego (lub poliakrylamidowego) albo porowatych granulek szklanych. Wiclocząstcczkowy gli-kan o masie cząsteczkowej około 40 000. usieciowany eptchlorhydryną występuje w postaci żelu dekstranowego (nazwa handlowa Scphadcx). niekiedy z dodatkową modyfikacją w postaci reszt hydrofobowych łańcucha cukrowego (ryc. I2.7a). Kolumnę można również uformować z drobin porowatych żywic poliestrowych, które

302