38

J

Szl

stół

Wy

grafi

fUfra

jego

4~w

mieś

śród;

RYS. 7. Technika krążkowa: a-sposób przygotowania chromatogramu, b - sposób umieszczenia go w komorze chromatograficznej; 1 - knot, 2 - arkusz bibuły, 3 - faza rozwijająca. 4 - połówki szalki Petriego o <p 20 cm, 5 - połówki szalki Petriego o <p 6-8 cm

knot

na ol

po 1

Tdenf

plamę

susżar

lenia

należY

zabarwieniu, co poza wartościami współczynnków Rf i wzorcami stanowi dodatkowy wskaźnik identyfikacyjny. Na przykład prolina z izatyną daje produkt o barwie niebieskiej, leucyna — czerwonofioletowej, lizyna — fioletowej, a cystyna — brązowej.

Odczynniki

1.    Bibuła chromatograficzna Whatman nr 3.

2.    Roztwór proliny (rozpuścić 0,5 g proliny w 500 ml acetonu i dodać 100 ml wody).

3.    Roztwór leucyny (rozpuścić 1 g leucyny w 250 ml wody i po podgrzaniu dodać 250 ml acetonu).

4.    Roztwór lizyny (rozpuścić 1 g lizyny w 500 ml acetonu i dodać 150 ml wody).

5.    Roztwór cystyny (rozpuścić 1,5 g cystyny w 500 ml wody, dodać 15 ml 1-molowego HC1, podgrzać i przesączyć).

6.    Układ rozpuszczalników (faza rozwijająca) — aceton: kwas octowy lodowaty: woda = 30:1:20 (świeżo przygotowany). W wypadku nieprawidłowego rozdziału aceton należy' destylować zbierając frakcje o temp. 56,5°C.

7.0,3-proc. roztwór izatyny w acetonie z dodatkiem 4-proc. kwasu octowego lodowatego.

cm i zanurzo

0's. 7)

krawędź

strumiei

rozpylać:

załączyć

UW£

szalki.

Opraco

Naty. czajnym zmierzyć tych w a mino kwa aminokwa