44

44

— stałe — zestalone dodatkiem substancji żelującej, np. 1,5-3% agaru. Prawidłowo przygotowane pożywki stałe powinny odznaczać się gładką i elastyczną powierzchnią oraz przejrzystością. Zestalone podłoża służą głównie do hodowli w płytkach Petriego, a także w probówkach, gdzie zestala się je w formie skosu lub słupka (ryc. 11).

Ogólne zasady przygotowania pożywek

Mając podany skład podłoża, przygotowuje się wodny roztwór, dodając do połowy końcowej objętości wody kolejno, zgodnie z recepturą, wszystkie składniki. Po ich rozpuszczeniu koryguje się pH i uzupełnia wodą do żądanej objętości. W zależności od rodzaju podłoża roztwór ogrzewa się w aparacie Kocha lub w autoklawie. Przygotowane wstępnie podłoże schładza się, ponownie koryguje pH i, jeśli potrzeba, sączy przez watę lub bibułę. Następnie rozlewa się do odpowiednich naczyń (probówek lub kolb) i wyjaławia w autoklawie lub w aparacie Kocha. Jeżeli sporządzamy podłoże stałe, to agar upłynniamy na gorąco (w 100°C). Po rozpuszczeniu agaru pożywkę sączy się i rozlewa. Niektóre składniki, jak cukry i substancje wzrostowe, np. witaminy, przygotowuje się jako oddzielne roztwory. Jałowi się je w aparacie Kocha lub na zimno, przepuszczając przez filtry bakteriologiczne i dodaje do pożywki w sposób jałowy tuż przed posiewem.

Ryc. 12. Sposób wylewania pożywki agarowej na płytkę Petriego