70 (135)

HgN -CH-COOH , a w silnie zasadowym przeważają aniony R

H₉N-CH-COCT ^Ł I R

W czasie miareczkowania wodorotlenkami metali alkalicznych całkowicie zdysocjowane aminokwasy zachowują sli? jak kwasy dwuzasadowe, tzn. mogą one w reakcji dwustopniown| oddać dwa protony:

HoN-CH-COOH ^ HoN-CH-COO ~ H₀N -CH-COO

° I    - h₂o °    |    - h₂o ^ I

R    R    R

Rejestrując występujące po dodaniu zmiany pH uzyskuje się dla aminokwasów typowe krzywe miareczkowania, np. alaniny:

Wartości pK poszczególnych stopni dysocjacji można wyznaczyt' za pomocą równania Hendersona-Hasselbalcha:

pH = pK + log-

[akceptor protonów]

[donor protonów]

Gdy stężenie molowe akceptora protonów jest równe stężeniu donora, wówczas mierzona wartość pH odpowiada wartości pK danego stopnia dysocjacji.

Z krzywej miareczkowania wynika, że dla pK₁ = 2.34 stężenie

H₃N⁺-CH-COOH jest równe stężeniu HgN^-CH-COO^- , podczas R    R

gdy dla pK₂ = 9.69 stężenie HgN-CH-COO^- jest równe stężeniu

R

H₂N -CH-COO Odpowiadające grupie karboksylowej i ami-^R    nowej wartości pł^ i pK₂ są punktami przegięcia

odpowiedniej części krzywej miareczkowania. W pH = 6.02 występuje centralny punkt przegięcia między dwoma ramionami krzywej miareczkowania alaniny. Przy tej wartości pH ładunek wypadkowy | cząsteczki jest równy zeru, a cząsteczka taka nie porusza się w polu elektrycznym. Jest to wartość pH punktu izoelektrycznego (pHj). W przypadku kwasów z jedną grupą aminową i jedną karboksylową punkt ten odpowiada średniej arytmetycznej wartości pK₁ i pK₂.

Aminokwasy mające w łańcuchu bocznym grupy zdolne do dysocjacji (kwas glutaminowy, kwas asparaginowy, cysteina, tyrozyna, lizyna, arginina, histydyna) charakteryzuje krzywa miareczkowania : trzema wartościami pK.

145